先在载玻片上滴上一小滴的水，再把载玻片放到一旁，这在接下来的实验中会很有用的，、
1.用镊子取上洋葱的外表皮，（紫色的那边），，是用镊撕取，这样可以得到单层的细胞，不能太厚了，否则观察效果不好，
2.把撕取的洋葱表皮放到
刚才的水中，这样可以让它能得到完整的会展。
3.盖上盖玻片。注意用镊子夹着，先让盖玻片的一条边先占上水，。。这样可以避免产生气泡。然后
用吸水纸吸去多余的水就行了，

鉴定细胞死活的方法:
死活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义。细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况,需要经常测定细胞的存活率；在肿瘤细胞的研究中,为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力,也需要测定肿瘤细胞的存活率。在临床医学中死活细胞的鉴定也有很大的应用,例如为了检测某一男子的生育能力,测定精子细胞的存活力是比较常用的办法。
死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法和仪器分析法。染色法是常用的细胞死活鉴定方法,简便,易于操作。但是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活,实验结果很容易受操作者的主观因素的影响,存在一定的误差,所以,在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测。
不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理,但无论采用何种办法,都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。
常用的方法包括染色法和仪器分析法:
1 染色法
染色法分化学染色法和荧光染色法,根据染色机理的不同,染料或使死细胞着色,或使活细胞着色。死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：
死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝。又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色。甲基蓝有类似的染色机理。植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。
死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。美蓝是一种无毒染料,氧化型为蓝色,还原型为无色。由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型,因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱,使美蓝处于氧化态,从而被染成蓝色或淡蓝色。
荧光素双醋酸酯（FDA）是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料。其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：oMuojONTsFDA本身不产生荧光,也无极性,能自由渗透出入完整的细胞膜.当FDA进入活细胞后,被细胞内的脂酶分解,生成有极性的、能产生荧光的物质——荧光素,该物质不能自由透过活的细胞膜,积累在细胞膜内,因而使有活力的细胞产生绿色荧光；而无活力的细胞因不能使FDA分解,而无法产生荧光。
除此之外,还有一些细胞器的专有染料。如液泡系的专有染料中性红。中性红是一种低毒性染料,可以使活细胞液泡着红色,而细胞质和细胞核不被着色；死细胞的液泡不被着色或浅oMuojONTs染,染料弥散于整个细胞中,细胞核和细胞质被染成红色。有时侯为了增加染色效果可以将两种染料结合使用,如甲基蓝-中性红混合染色法。
2 仪器分析法
可采用微电极技术（利用死活细胞膜两侧电位的差异）、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪等,可对细胞的死活进行精确的批量检测。
德国INNOVATIS出产的全自动Cedex细胞存活率/细胞计数仪/细胞分析仪是世界上第一台高分辨率、高清晰度扫描(专利)细胞分析仪,具有全自动台盼蓝染色、显微CCD成象、CEDEX工作站软件,可用于制药、医学、发酵、免疫、病理日夏养花网、毒性测试、生物技术等学科的研究开发和工业生产过程中的细胞计数和分析。自动分析结果,检测分析数据输出（11项)：总细胞数目,总细胞浓度 (cells/mL) ；活细胞数目,活细胞浓度 (cells/mL)；死细胞数目,死细胞浓度 (cells/mL) ；细胞存活率 (%) ；细胞的平均圆度 (compactness) ；细胞的平均直径 (um) ；细胞团比例 （Aggregate Rate）；细胞直径分布图 （Diameter Histogram）；细胞团分布图 （Aggregate Histogram）；细胞圆度分布图 (Compactness Histogram) ；细胞生长时间曲线（Cultivation Time Chart）。
流式细胞仪法用来判断细胞死活的常用荧光探针有二大类：一类是能透过活的细胞膜进入细胞内而发出荧光的物质,例如FDA可被活细胞持留而发出黄绿色荧光,若细胞有损伤则会从细胞中流失,观察不到荧光。另一类是不能透过活细胞膜,但能对固定的细胞及膜有破损的细胞的核进行染色,例如碘化丙啶（ PI,Propidium iodide ）和溴化乙锭（ EB,Ethidium bromide ）就是常用的第二类荧光探针。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。目前常用的一种细胞凋亡与坏死检测试剂盒则含有Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)两种荧光染料。细胞发生凋亡时,染色质会固缩,Hoechst 33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光。

A对，正常原生质层对大分子色素没有通透性，因此紫色物质的流出说明了原生质的死亡，即细胞死亡。

B对，细胞质的环流是细胞存活的一大体现。

C不对，还有可能是水绵细胞死亡了。

D对，只有活的有大液泡的植物细胞才会发生质壁分离现象

BCD都是对的，A是错的，因为盐酸会破坏膜的选择透过性，这就会导致不论死细胞或活细胞都会变色

选C . A，溶液变紫色说明原生质层已破坏 C，可能是厌氧型或兼氧型 如酵母菌 或水绵已死亡D，死细胞不能发生质壁分离

A 细胞变色 应该是因为酸性物质对染色体的染色导致的吧 原因不确定 但是A肯定错

用颜色的水中，看其是否有吸水，记得用显微镜下观察啊，若细胞吸水则证明是活的，否则是死的

（1）实验材料的选择

最常用的实验材料是紫色洋葱鳞片叶，它的外表皮细胞的液泡较大，细胞液中日夏养花网有紫色的花青素，在显微镜下，紫色大液泡十分明显，能方便地观察到质壁分离及其复原的过程。如无紫色洋葱，可用葫芦藓或其他藓类植物的叶片代替。藓类植物的叶片仅一层细胞，每个叶细胞内含多数叶绿体，当浸浴在30%的蔗糖溶液中时，叶绿体随细胞原生质的收缩而聚拢，观察质壁分离极为方便。选择材料必须都是活细胞，因为只有活细胞的原生质层才具有选择透过性，否则将不会出现质壁分离及其复原现象。

（2）试剂种类的选择

使细胞发生质壁分离的试剂不只一种，只要不伤害细胞即可。常用的试剂：有5%的食盐溶液和30%蔗糖溶液。用5%食盐溶液做分离试剂，细胞质壁分离和复原的速度较快，一般在0.6min内即发生质壁分离现象，在1—2min内即可发生质壁分离的复原。用30%蔗糖溶液做分离试剂，细胞发生质壁分离和复原的速度较缓慢，但便于观察变化过程。发生质壁分离约需6min，换清水后，发生质壁分离复原约需8～lOmin。如果使用甘油或质量浓度为0.lg/mL的硝酸钾溶液做分离试剂，细胞质壁分离之后又会自动复原，原因是这些物质中的溶质也能通过细胞膜，仅仅是比水的速度慢。

（3）试剂浓度的选择

试剂浓度影响细胞发生质壁分离的速度，试剂浓度越高，发生质壁分离的速度越快。但试剂浓度过高，细胞也因过度失水而死亡，无法复原。用蔗糖溶液做质壁分离试剂，随着浓度从5%到30%递增，质壁分离所需时间逐渐缩短，但当浓度达到60%以上，一般不能发生oMuojONTs质壁分离复原。

（4）本实验要求用高倍镜观察，在显微镜载物台上进行引流换液操作，技术要求较高。除按显微镜操作注意事项进行操作外，还要细心，一次滴液不要太多，避免糖液溢至盖玻片上，污染物镜镜头。在观察质壁分离现象时，要在显微镜下找到处于鳞片叶外表皮边缘的细胞，因为这里的细胞最先接触蔗糖溶液，因而也会先出现质壁分离。同理，观察质壁复原时，也应如此。

感受？这么2的题目？一显微镜是观察细胞的重要实验器材 二洋葱表皮细胞的结构精密。我们做这个实验，也要力求精准，避免失败。三:生物的学习要将实验与理论相联系，用理论指引实践，用时间检验理论。

洋葱果然很抢人……

做实验比上正课爽多了

洋葱的表皮分为很多层细胞。
拿来一个完整的洋葱，最外面包裹着一层很薄的松软、干燥、发脆，很容易破裂的一层薄膜，这着一层表皮是死细胞，特点是纤维化，干燥，脆，很容易就能撕开，但是因为它含水分极少，能够有效抵挡细菌入侵。
去掉这一层薄膜，里面含有水分的瓤瓣表面的表皮那一层是活细胞。这就是高中生物实验中用来观察洋葱表皮细胞和做质壁分离的那一层。
它确实属于"表皮细胞"，但只是内表皮而已

显然不是，它有细胞结构还承担一定的机能，怎么可能是死的，只有离开培养环境的才会死亡。你是不是因为平常看我们吃的洋葱表皮干燥才这样的？这跟树茎部分的导管是不一样。

因为洋葱表皮细胞是植物细胞，细胞液中含有一定浓度的糖，而30%蔗糖溶液比细胞液浓度稍高，能让细胞失去部分水而质壁分离，但失去的水还没达到细胞容忍的上限，所以细胞没死，还活得好好的。

不是，高中课本用它来做质壁分离和复原的实验