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水稻草状矮化病毒病的理化特性是什么?

2022-06-01 11:18:59 分类:养花问答 来源: 日夏养花网 作者: 网络整理 阅读:114

水稻黑条矮缩病毒的理化特性是什么?

病毒名称:水稻黑条矮缩病毒Rice black streaked dwarf virus(RBSDV)。

分类地位www.rixia.cc:斐济病毒属Fijivirus,呼肠孤病毒科Reoviridae。

病毒异名:水稻黑条病毒Rice black streak virus、水稻线条矮缩病毒Rice streak dwarf virus。

病毒提纯:取接种病株300g,加3倍量的0.1mol/L(pH7.0)磷酸缓冲液(内含0.01mol/LMgCl2)研磨,过滤,经5000g离心15min,上清加6%PEG(分子质量为6000u)、0.3mol/LNaCl,冰浴搅拌1h,离心(9800g)15min,取沉淀以60ml0.1mol/L磷酸缓冲液悬浮,经7500g离心10min,取上清液加6%PEG(分子质量为http://www.rixia.cc6ku)、0.3mol/LNaCl、1%TritonX—100,冰浴搅拌1h,经9800g离心15min,取沉淀,以少量0.日夏养花网01mol/L磷酸缓冲液悬浮,经7500g离心10min,取上清液,以10%~40%蔗糖密度梯度离心(65000g)45min,获病毒带,经40%~60%蔗糖密度梯度离心(65000g)4h,分部搜集,合并有病毒部分,经128000g离心1h,取沉淀加0.01mol/L磷酸缓冲液再悬浮,经7000g离心10min,即得提纯的RBSDV(林奇英等,未发表)。

病毒理化特性:

①病毒粒子:为等轴球状,无胞膜,完整粒体具双层衣壳,提纯病毒粒子直径为60~70nJIKyVJfyDwm,但在病株和带毒昆虫细胞中病毒粒子分别为75~80nm和50~55nm(Shikata,1974)。

②核酸:双链RNA(dsRNA),为10个dsRNA片段,总分子质量为19.0*106u或19.7*106u(Reddy etal.,1975)。10个片段中有一个共同的5′端序列AAGUUUUU-和3′端序列-UGUC或-CGUC(Azuhata etal.,1989,1990,1991)。对所有片段3′和5′端序列的分析可形成一个推测的反向重复序列。10片段含有一个编码559个氨基酸的阅读框,其多肽分子质量为63ku(Azuhata etal.,1989)。

③蛋白:有6个多肽,分子质量分别为58、60、120、125、135和155ku(Mikoshiba etal.,1988)。

水稻东格鲁病毒病的理化性质是什么?

水稻东格鲁杆状病毒Rice tungro bacilliform virus(RTBV),

水稻东格鲁球状病毒Rice tungro spherical virus(RTSV)。

分类地位:

水稻东格鲁杆状病毒属于水稻东格鲁杆状病毒属Rice tungro bacilliform-like viruses,花椰菜花叶病毒科Caulimoviridae。

水稻东格鲁球状病毒属于矮化病毒属Waikavirus,伴生病毒科Sequiviridae。

在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码分别为00.015.0.04.001(RTBV)和00.065.0.02.004(RTSV)。

病毒异名:水稻叶黄病毒(Rice leaf yellowing virus)=RTSV、水稻矮化病毒(Rice waika virus)=RTSV、水稻孟德克病毒(Rice Mentek virus)=RTSV、水稻‘Bangkhen’病毒(Rice ‘bangkhen’ virus)=RTBV,Rice yellow orange leaf virus=rtbv。

病毒提纯:RTSV病叶加入0.01M(pH8.0)EDTA研磨,匀浆置40℃水浴中温育1h,使混合液澄清,以7%PEG(6000)、0.2mol/LNaCl、1%tritonX—100沉淀,弃上清,加入20%四氯化碳重悬沉淀,分别以40000(r/min)离心40min和10000(r/min)离心10min(Beckman,RT-6www.rixia.cc5转头),上清用10%~50%蔗糖密度梯度(0.01mol/L磷酸缓冲液,pH7.4)25000(r/min)离心180min,收集病毒带,用0.01mol/L(pH8.0)EDTA稀释,40000(r/min)离心40min,取沉淀用0.01mol/L(pH7.4)磷酸缓冲液重悬,以10000(r/min)离心10min,上清中即含有RTSV(Hibino,1985)。从水稻东格鲁病株中分离提纯RTBV和RTSV比较困难。Omura等(1983)通过蔗糖密度梯度离心3次,分离出RTBV,然后用日本的水稻矮化病毒(RTSV)抗血清沉淀RTSV。

病毒理化特性:

①病毒粒子:RTV在病株中存在两种粒子——球状(RTSV)和杆状(RTBV)。RTBV粒子为杆状,两端圆滑,侧边平行,无包膜,大小为110~400nm*30~35nm。RTBV有一沉降组分,在氯化铯中的浮力密度为1.312g/cm3,A260/A280是1.11(Hibino,1990)。RTSV粒子为球状,直径为30~35nm,无包膜。RTSV的沉降系数1755S(Galvez,1968),在氯化铯中的浮力密度为1.551g/cm3,A260/A280是1.75(Hibino,1990)。

②核酸:RTBV为单分子开环状双链DNA(dsDNA),长度为8.3kb。RTSV核酸含量为12%,为单分子线状单链RNA(ssRNA),长度约12kb,分子质量为3.7*106u。

③蛋白质:RTBV由4个ORF编码24、12、19和46ku的蛋白。RTSV外壳蛋白由三个多肽组成,分子质量为22.9、22.3和36ku。

株系:比较混乱。在菲律宾根据RTV在FK135的症状反应,划分为S和M两个株系(Rivera&Ou,1967),后又增加一个T株系(Galvez et al.,1970)。在印度,根据台中1号(TN1)的症状反应,先后划分为RTV1、RTV2、RTV2B和RTV3四个株系(Shastry et al.,1972;Anjaneyulu&John,1972)。在中国根据中菲水稻东格鲁4个毒株的比较研究,采用血清学方法将各型接种病株加以分离,然后采用鉴别特征明显的Kataribhog和桂朝2号两品种进行测定,将RTBV划分为RTBV-1和RTBV-2两个株系,将RTSV划分为RTSV-1、RTSV-2和RTSV-3三个株系(林奇英等,1993)。

稗草齿叶矮化病毒病病原特性是什么?

病毒名称:稗草齿叶矮缩病毒Echinochloaraggedstuntvirus(ERSV)。病毒提纯:提取液加四氯化碳澄清,1%tritonX-100处理,差速离心,上清液经20%蔗糖垫沉淀,再进行线形蔗糖密度梯度离心,可得部分提纯制剂(Chenetal.,1989)。病毒理化特性:①病毒粒子。球状,直径60~70nm。②核酸。双链RNA,10基因组,分子质量0.6110^6~2.810^6u,基因组分子质量之和为17.8910^6u(Chenetal.,1989)。③蛋白。4组分,分子质量127、123、63和34ku。其他:根据昆虫介体的专化性,粒子的形态和结构,基因节分数和大小,基因末端序列,可将Reoviridae分成3属:Phytorevirus,Fijivirus和Oryzavirus。水稻齿叶矮缩病毒和稗草齿叶矮缩病毒是Oryzavirus的成员(Yanetal.,1994)。

水稻草状矮化病毒病是怎样检验与检疫的?

鉴别寄主:水稻栽培品种Shan-san-sa-san,受感染时表现出显著的条纹(Ling et al.,1970)。水稻品种TN1、TN65和Kalimpong Ⅰ表现感病,而IR32表现抗病。

体外稳定性:

①钝化温度:50℃(Chen&Wang,1981)。

②稀释终点:10-2~10-3(病株汁液)或10-3~10-6(带毒虫汁液)(Chen&Wang,1984;Hibino et al.,1982;Senboku&Shikatas,1980)。

③体外存活期:12h(室温下)或6d以上(4℃下)(Chen&Wang,1984;Hibino et al.,1982)。

血清学检测:RGSV在与同属的其他三种病毒之间,仅与水稻条纹病毒(RSV)有较远的血清学关系,而与水稻白叶病毒(Rice hoja blank virus,RHBV)及玉米条纹病毒(Maize stripe virus,MSPV)没有血清学关系(Hibino et al.,1985;Chen et al.,1993)。

检疫危险性评价:本病的病原体水稻草矮病毒,可通过飞虱持久性传播,对水稻生产可构成重大经济损失。季良进行危险性评价时危险度值9分,为高危有害生物。因无人为传播途径,且国内已普遍发生,为非检疫性有害生物。但鉴于其农业生产的危害性,应列入国内防治重点。

地理分布:中国(福建、台湾、广东、广西、海南)、日本、泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚、孟加拉国、印度、越南、斯里兰卡。

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