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关于配制植物组织培养所用的MS培养基中激素量的问题。

2022-05-05 03:19:01 分类:养花问答 来源: 日夏养花网 作者: 网络整理 阅读:129

植物组织培养用MS培养基外,要加什么激素?

1L培养基中要加各种激素的量是多少?
这个显然要看你需要的目的来确定使用何种植物激素以及其物质的量浓度!
对于植物组培:
使用顺序:实验结果
先使用生长素,使用细胞分裂素:有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用细胞分裂素,后使用生长素:细胞既分裂也分化
同时使用:分化频率提高

浓度:
生长素/细胞分裂素
比值高:促进根的分化,抑制芽的生长
比值低则反之
适中,促进愈伤组织形成
生长素类:溶于95%的乙醇或0.1mol的NaOH中,用去离子水或蒸馏水定容。贮于棕色贮液瓶中,贴好标签后放入冰箱内低温保存,NAA、IBA、IAA、2、4-D一般多用少量95%乙醇溶解,然后用加热的蒸馏水定容。

关于植物组培中MS培养基,激素BA,NAA的疑问

植物组培中MS培养基中都有哪些物质?rn激素BA和NAA的学名是什么?都有什么作用?rn在促进百合科植物愈伤组织根的分化应应用哪些激日夏养花网素?
1 MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列日夏养花网出,供配制时使用。

大量元素(母液Ⅰ) mg/L

NH4NO3 33 000

KNO3 38 000

CaCl22H2O 8 800

MgSO47H2O 7 400

KH2PO4 3 400

微量元素(母液Ⅱ)

KI 166

H3BO3 1 240

MnSO44H2O 4 460

ZnSO47H2O 1 720

Na2MoO42H2O 50

CuSO45H2O 5

CoCl26H2O 5

铁盐(母液Ⅲ)

FeSO47H2O 5 560

Na2-EDTA2H2O 7 460

有机成分(母液Ⅳ)

ⅣA

肌醇 20 000

ⅣB

烟酸 100

盐酸吡哆醇(维生素B6) 100

盐酸硫胺素(维生素B1) 100

甘氨酸 400

以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,日夏养花网并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。

配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中。

配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放http://www.rixia.cc母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。

溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。

调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)。

2 BA为细胞分裂素 NAA 是萘乙酸,为生长素的一种
3 适于百合根的激素暂时没找到
以下是叶片和胚的激素:对麝香百合 (LiliumlongiflorumThunb)叶片进行离体培养 ,可成功获得无菌苗。试验结果表明 :培养基MS +BA 0 1mg/L +NAA 1 0mg/L适于初代培养 ,有助于根和芽的分化 ;MS +BA 0 5mg/L +NAA1 5mg/L适于增殖培养 ,利于愈伤组织的产生 ,并促进芽的分化 ;生根培养基为 1/ 2MS +NAA 1 0mg/L +多效唑 10 0mg/L ;当试管苗根长 1cm时移栽易成活
在含有1 mg/ L IAA,1 m g/ L GA3,6 0 0 m g/ L CH的 MS培养基上培养 ,蔗糖含量为 6 %~ 8%时 ,百合幼胚胚性生长最好 ,培养 30 d后可以得到正常胚 .在含有 0 .1 m g/ L NAA,1 m g/ L BA的 MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织 ,将这些愈伤组织转移到 1 / 2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽 ,不定芽生根移栽后 ,其成活率可达90 %以上

关于配制植物组织培养所用的MS培养基中激素量的问题。

a、ms培养基一般含植物激素,微生物培养基不含植物激素,a正确;
b、氨基酸作为特殊营养物质,ms培养基和微生物培养基都可能还有,b错误;
c、ms培养基和微生物培养基都需要碳源,c错误;
d、ms培养基和微生物培养基都需要维生素b1,d错误.
故选:a.

如何计算植物培养基所需激素的量

比如说我们配了1升的培养基,现在所需NAA0.2mg/L,只有0.1mg/mL的NAA请问要放多少谢谢
分析:也就是说:0.1mg/mL=10http://www.rixia.cc0mg/L的NAA稀释成0.2mg/L
单位换算:1L=1000mL 1mg/mL=1000mg/L
根据质量守恒定律:
设:需要a mL
a*100=1000*0.2
解得a=2mL

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