方法二 乳糖、蔗糖和总糖的测定（莱因-埃农氏法） 9 方法提要 http://www.rixia.cc乳糖：样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜 还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，以终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基 蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：样品除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖，再按还原糖测定。将水解前后 转化糖的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。 总糖：乳糖和蔗糖之和。 10 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 10．1 费林氏液（甲液和乙液） 10．1．1 甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。 10．1．2 乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL，静置两天后过滤。 10．2 次甲基蓝溶液：10g/L。 10．3 盐酸溶液：体积比1：1。 10．4 酚酞溶液：0.5g酚酞溶液于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20mL水，然后再加入约0.1mol/L的氢氧化钠 溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至100mL。 10．5 氢氧化钠溶液：c（NaOH）为300g/L。取300g氢氧化钠，溶于1000mL水中。 10．6 乙酸铅溶液：c（PbAc 2 ）为200g/L。取20g乙酸铅，溶解于100mL水中。 10．7 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100mL水中。 11 仪器 ：常用理化实验室仪器。 12 操作步骤及结果计算 12．1 费林氏液的标定 12．1．1 用乳www.rixia.cc糖标定 12．1．1．1 称取预先在92～94℃烘箱中干燥2h，乳糖标样约0.75g（准确至0.2mg），用水溶解并稀释至250mL。将 此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 12．1．1．2 预滴定：取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中。再加入20mL蒸馏水，从滴定管中放出 15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝溶液（10.2），继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖 的毫升数。 12．1．1．3 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙液各5mWqPblaL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比 预备滴定量少0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入 3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算 的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。 12．1．1．4 按式（2）、（3）计算乳糖测定时，费林氏液的乳糖校正值（f 1 ）: V 1 ——滴定时消耗乳糖液量，mL； m 1 ——称取乳糖的质量，g； AL 1 ——由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，mg。 表1 乳糖及转化糖因数表（10mL费林氏液） 12．1．2 用蔗糖标定 12．1．2．1 称取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g（准确到0.2mg），用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中，加水 10mL，再加入10mL盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s之间，使瓶内温度升至67℃。 自达到67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至35℃ 时，加2滴甲基红指示剂（10.4），用300g/L的氢氧化钠（10.5）中和至呈中性。冷却至20℃，用水稀释至刻度，摇 匀。并在此温度下保温30min后再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化糖量。 12．1．2．2 按式（4）、（5）计算蔗糖测定时，费林氏液的蔗糖校正值（f 2 ）： V 2 ——滴定时消耗蔗糖液量，mL； m 2 ——称取蔗糖的质量，g； AL 2 ——由蔗糖液滴定毫升数查表1所得的转化糖数，mg。 12．2 乳糖的测定 12．2．1 样品处理 12．2．1．1 称取2.5～3g样品（准确至0.01g），用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。 12．2．1．2 加4mL乙酸铅（10.6）、4mL草酸钾-磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶， 用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。 12．2．2 滴定 12．2．2．1 预滴定：将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧 瓶中，再加入20mL蒸馏水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝（10.2），然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 12．2．2．2 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预 备0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基 蓝溶液，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖 时，此即为转化后滴定量）。 12．2．3 乳糖含量的计算 式中：L——样品中乳糖的质量分数，g/100g； F 1 ——由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 1 ——费林氏液乳糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3 蔗糖的测定 12．3．1 转化前转化糖量的计算 利用测定乳糖时的滴定时，自表1中查出相对应的转化糖量，按式（7）计算： 式中：F 2 ——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3．2 样液的转化及滴定 取50mL样液于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL的盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s 之间，使瓶内温度升至67℃。自达至67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水 冷却，当瓶内温度冷却至35℃时，加2滴酚酞溶液剂（10.4），用氢氧化钠（10.5）中和至呈中性，冷却至20℃，用 水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温30min后再按12.2.2滴定，得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化液量。 式中：F 3 ——由V2 2 1查得转化糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； m——样品的质量，g； V 1 ——滴定消耗转化液量，mL。 12．3．3 蔗糖含量的计算 式中：L 1 ——转化后转化糖的质量分数，%； L 2 ——转化前转化糖的质量分数，%。 12．3．4 若样品中乳糖与蔗糖之比超过3：1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表1和计算。 12．3．5 总糖=蔗糖+乳糖 13 允许差 13．1 重复性 ：由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间的差值，不应超过结果平均值的1.5%。 13．2 重现性 ：由不同实验室的两个分析人员对同一样品测得的两个结果之差，不应超过结果平均值的2.5%。 表2 乳糖滴定量校正值数 方法三 蔗糖的测定——（酶比色法） 同GB/T 16286。

糖果—还原糖的测定—直接滴定法
2 原理
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝作指示剂，根据样品液消耗体积，计算还原糖量。
3 试剂
3.1 碱性酒石酸铜甲液
称取15g硫酸铜（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。
3.2 碱性酒石酸铜乙液
称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.3 乙酸锌溶液
称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
3.4 亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4）
称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
3.5 葡萄糖标准溶液（1mg/mL）
精密称取1.000g经过98～100℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。
3.6 盐酸
4 仪器
4.1 实验室常规仪器和设备
4.2 古氏坩埚或G4垂融坩埚
5 操作步骤
5.1 样品处理
将样品捣碎混匀待用，样品应避免暴露在空气和阳光下，并尽可能迅速地进行分析。
称取约2.5～5g样品，置于250mL容量瓶中，加50 mL水，摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液5mL及亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
5.2 标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10mL（甲、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
5.3 样品溶液预测
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。
5.4 www.rixia.cc样品溶液测定 1
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加比预测体积少1mL的样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
6 结果计算
按下式计算糖果中还原糖的含量： 100100025021=VmmX
式中：X—样品中还原糖的含量（以葡萄糖计），%；
m1—10mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5mL）相当于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mg；
m2—样品质量，g；
V—测定时平均消耗样品溶液体积，mL。
7 精密度
同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。

直接滴定法测总糖适合检测什么食品
总糖的测定（直接滴定法）
滴定, 蒸馏水, 葡萄糖, 酒石酸, 试剂
斐林氏试剂

甲液：称取15g硫酸铜（CuSO45H2O）及0.05g次甲基兰，用蒸馏水溶解。移入1000mL棕色容量瓶中，用蒸馏水定容。
乙液：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，移入1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。
斐林氏溶液的标定：吸取斐林氏甲液和乙液各5mL于150mL三角瓶中加水10ml，从滴定管中滴加约9.5mL葡萄糖标准溶液控制在2min内加热至沸，趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖标准溶液。滴定至蓝色退尽为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。同时平行操作三份，取其平均值计算第10mL日夏养花网（甲乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
A=W*V/1000
式中：
A——10ml斐林氏甲乙液，相当于葡萄糖克数，g；
W——称取葡萄糖克数，g；
V——滴定时所消耗葡萄糖的毫升数，mL；
1000——葡萄糖的稀释倍数。

答：
用标准葡萄糖溶液标定菲林试剂再用菲林试剂测定食品哦

糖类的定义是多羟基醛或多羟基酮及它们的缩合物.还原糖是指能和斐林试剂“新制氢氧化铜”反应生成砖红色沉淀氧化亚铜的糖类,包括全部单糖以及有游离醛基的寡糖,例如葡萄糖、果糖、麦芽糖,高分子糖类均不是还原糖.