1、培养基配方的选定
　　同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。
　　2、培养基的制备记录
　　每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
　　3、培养基成分的称取
　　培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方面军做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还应进行一次检查。
　　4、培养基各成份的混合和溶化
　　培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最好使用不锈钢莴加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭日夏养花网菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如为琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两日夏养花网溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。
　　5、培养基pH的初步调正
　　因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。例如，牛肉浸液约可降低pH0.2，而肠浸液pH却会有显著的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终PH，保证培养基的质量。PH调整后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。
　　6、培养基的过滤澄清
　　液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此 ，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应折叠成折扇或漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。
　　琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去，再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55~60C的培养基放入大的三角烧瓶内，装入量不得超过烧瓶容量的1/2，每1000ml培养基加入1~2个鸡蛋的蛋白，强力振摇3~5分钟，置高压蒸汽灭菌器中、121C加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。
　　7、培养基的分装
　　培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基最终pH之用。
　　8、培养基的灭菌
　　一般培养基可采用121C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培www.rixia.cc养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。
　　某些畏热成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50C左右的培养基中。
　　琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至55℃-60℃时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。
　　9、培养基的质量测试
　　每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。
　　将全部培养基放入361C恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。
　　用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基，培养24~48小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。
　　10、培养基的保存
　　培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。

1、选择适宜的营养物质
2、营养物质浓度及配比合适
3、控制pH条件
4、控制氧化还原电位(redox　potential)
5、原料来源的选择
6、灭菌处理

发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用.它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物.因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等.但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足.
操作方法和注意事项如下
加水
打开灭菌锅盖,向锅内加水到水位线.立式消毒锅最好用已煮开过的水,以便减少水垢在锅内的积存.注意水要加够,防止灭菌过程中干锅.
装料、加盖
灭菌材料放好后,关闭灭菌器盖,采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋,使蒸汽锅密闭,勿使漏气.
排气
打开排气口(也叫放气阀).用电炉加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出,当有大量蒸汽排出时,维持5min,使锅内冷空气完全排净.
升压、保压和降压
当锅内冷空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升.当压力上升至所需压力时,控制电压以维持恒温,并开始计算灭菌时间,待时间达到要求（一般培养基和器皿灭菌控制在121℃,20min）后,停止加热,待压力降至接近“0”时,打开放气阀.注意不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出容器之外.
灭菌后的培养基空白培养
灭菌后的培养基放于37℃培养箱中培养,经24h培养无菌生长,可保存备用；斜面培养基取出后,立即摆成斜面后空白培养；半固体的培养基垂直放置凝成半固体深层琼脂后,空白培养.

一、关于培养基配制
　　1、当然是注意浓度配比不要搞错
　　2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生
　　3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀
　　4、不要忘了调节pH值（一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定）
　　5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质
二、关于微量元素：要看是什么微量元素
　　1、如果是抗生素、维生素等不耐热物质,应该先过滤除菌,再加入灭好菌的培养基中.
　　2、如果是金属离子等耐热眼泪,可以配制成母液,配制培养基时加入适量即可同时灭菌.
三、关于浓度配比：既然需要配制培养基,就说明已经到了实验室阶段
　　1、为了可重复性.总不能今天是这样,明天又那样吧.
　　2、有适合不适合.
　　3、为了得到最好的培养效果.

一、关于培养基配制
1、当然是注意浓度配比不要搞错
2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生
3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀
4、不要忘了调节pH值（一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定）
5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质
二、关于微量元素：要看是什么微量元素
1、如果是抗生素、维生素等不耐热物质,应该先过滤除菌,再加入灭好菌的培养基中.
2、如果是金属离日夏养花网子等耐热眼泪,可以配制成母液,配制培养基时加入适量即可同时灭菌.
三、关于浓度配比：既然需要配制培养基,就说明已经到了实验室阶段
1、为了可重复性.总不能今天是这样,明天又那样吧.
2、有适合不适合.
3、为了得到最好的培养效果.

配置培养基需要：
1、 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、 注意各种营养物质的浓度及合www.rixia.cc适配比，保持合适渗透压 。
3、 将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内，以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、要注意各种原料的配比，每种培养基的配比合适的配比，可以按照老师的要求去做。
5、如需要加热的时候注意时间的把握。

1，培养基各种成分精确称取并要注意防止错乱。
2，培养基所用化学药品均应是化学纯的，尽量使用大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
3，液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀。
4，培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正。
5，确保培养基配方的选定的准确和培养基的制备记录完整。
6，一般培养基需121℃ 高压蒸汽灭菌15分钟。
7，培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周。

无菌。。。。。

按配方计算培养基中各种成分的用量→称量，（一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解在水中，如果是固体培养基，需要使用凝固剂，如琼脂等，熔化时，注意搅拌，防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板