由于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂加入水中使容积介电常数降低，增加了相反电荷的吸引力，另一方面因为这些有机溶剂是强亲水试剂，争夺蛋白质分子表面的水化水，破坏蛋白质胶体分子表面的水化层而使分子聚集沉淀。
当蛋白沉淀后，立即分离蛋白和丙酮并复溶蛋白完成提取

医用的酒精通常是浓度为75%的溶液，它的主要成分是乙醇。酒精主要杀菌的原理就是由于它有较强的挥发性，它能够吸收细菌蛋白的水分，脱水凝固，从而达到杀死细菌的目的。但是酒精的刺激性较大，一部分患者对疼痛比较敏感时，用它进行伤口的消毒会www.rixia.cc有明显的疼痛和刺痛感。另外，对于酒精过敏的患者，使用酒精消毒后会使局部伤口、术后切口处发生脂肪液化。

现在比较推荐的使用是碘伏和酒精联用，主要是以碘伏为主，碘伏是由单质碘和聚乙烯吡咯烷酮所构成，是一种结合物，它可以在创面形成一层杀菌膜，还能保护创口。碘伏的作用相对较广泛，刺激性小，所以更能容易被患者接受。但是碘伏不能和红汞水合用，会形成剧毒的氯化汞。

医生在给病人注射药液之前，总要用蘸有酒精的药棉在病人的皮肤上擦几下。这是为了杀菌消毒。酒精能杀菌消毒，这是大家都知道的。但酒精为什么能杀菌消毒?什么样的酒精杀菌消毒的效果最好?大家就不一定能够答上来了。 酒精是一种有机化合物，学名叫乙醇，分子式为C2H5OH。酒精的分子具有很大的渗透能力，它能穿过细菌表面的膜，打 入细菌的内部，使构成细菌生命基础的蛋白质凝固，将细菌杀死。 照这样说来，要使酒精的杀菌消毒效果好，当然是酒精越浓www.rixia.cc越好了。然而奇怪的是，纯酒精反而不能彻底杀死病菌。这是为什么呢? 原来，浓度几乎达到100％的纯酒精使蛋白质凝固的本领固然很大，但是它却使细菌表面的蛋白质一下子就凝固起来，形成了一层硬膜。这层硬膜阻止酒精分子进一步渗入细菌内部，反而保护了细菌，使它免遭死亡。 在纯酒精中搀入一定量的水以后，酒精就不会使细菌表面的蛋白质一下子凝固，于是大量酒精分子钻进到细菌体内，使其中的蛋白质都凝固起来，细菌就难逃一死了。人们经过反复的试验，知道浓度为75％的酒精杀菌力最强，所以医用消毒酒精一般都是含75％的纯酒精和25％的水

酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。75%的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于75%时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。

由此可见，酒精杀菌消毒能力的强弱与其浓度大小有直接的关系，过高或过低都不行，效果最好的是75%。酒精极易挥发，因此，消毒酒精配好后，应立即置于密封性能良好的瓶中密封保存、备用，以免因挥发而降低浓度，影响杀菌效果。另外，酒精的刺激性较大，粘膜消毒应忌用。

盐析法——多用于各种蛋白质和酶的分离纯化
在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析.常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等.各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同,故可用于对混和蛋白质组分的分离.例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,盐析沉淀的蛋白质,经透析除盐,仍保证蛋白质的活性.调节蛋白质溶液的pH至等电点后,再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好.盐析法分为两类,第一类叫Ks分段盐析法,在一定PH和温度下通过改变离子强度实现,用于早期的粗提液；第二种叫b分段盐析法,在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现,用于后期进一步分离纯化和结晶.影响盐析的因素包括：蛋白质浓度、离子强度和类型、PH值、温度等.针对温度这一条,需要强调：在低离子强度或纯水中,蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加.但在高浓度下,蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降.在一般情况下,蛋白质对盐析温度无特殊要求,可在室温下进行,只有某些对温度比较敏感的酶要求在0-4℃进行.
使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意：硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,使用前必须用H2S处理：将硫酸铵配成浓溶液,通入H2S饱和,放置过夜,用滤纸除去重金属离子,浓缩结晶,100℃烘干后使用.另外,高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性(PH=5.0左右),使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH.
2.有机溶剂沉淀法——多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化；
有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出.该法优点在于：1)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀；2)沉淀不用脱盐,过滤较为容易；3)在生化制备中应用比盐析法广泛.但是,在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性.例如酒精消毒灭菌就是如此.因此,操作要求在低温下进行.有机溶剂的选择首先是能和水混溶,使用较多的有机溶剂是乙醇、甲醇、丙酮,还有二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等.
3.等电点沉淀法——此法单独应用较少,多与其它方法结合使用；
两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低日夏养花网,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离.如工业上生产胰岛素时

乙醇沉淀蛋白质是蛋白发生变性析出，操作也就www.rixia.cc是把乙醇滴加到蛋白质溶液中去即可