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配制培养基的步骤?

2021-11-05 03:20:48 分类:养花问答 来源: 日夏养花网 作者: 网络整理 阅读:147

微生物培养基配置的基本步骤???

1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量。
2,称量。
3,溶解。
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积。
5,分装。
6,消毒。
7,使用。
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别。
1计算 根据培养基配方比例计算各种成分用量 2称量 准确称量各种成分 3溶化加入少量水 加热 4灭菌 将培养基放入高压灭菌锅160-170C 2h 5倒平板 冷却至50C在酒精灯火焰附近倒平板

配制培养基的基本步骤有哪些

计算→称量→溶化→调节pH→分装→加棉塞→包扎→灭菌→搁置斜面
计算→称量→溶uDQlaiNQ化→灭菌→倒平板
根据配方称量,然后加水,搅拌溶解(或熔化),NaOH或Hcl调整PH值,大约7.0左右(或按照配方要求),之后分装到三角瓶中,加棉塞,121度高压灭菌30min(通常),取出冷却后即可使用
嗯,介绍一下几种常日夏养花网用培养基的制备过程吧:
1.牛肉膏蛋白胨培养基:
主要用于培养细菌:称量→溶解→定容→调pH→分装→包扎→灭菌
2.马铃薯培养基:
主要用于培养真菌:土豆切块加水煮→纱布过滤→加蔗糖→定容→调pH→分装→灭菌
3.高氏1号培养基:
主要用于培养放线菌:称量→溶解→调pH→分装→包扎→灭菌

配置培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题

快速制作斜面培养基方法
制作培养基斜面是制备菌种不可缺少的一步,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。我们在实践中摸索出一种简捷快速制备斜面培养基的方法,现介绍如下:
1.将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。
2.在并排5支试管上面平置截好的胶合板,再在胶合板上面并排放5支试管,然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好,用线扎紧,使胶合板两侧的试管保持平行,置高压锅中灭菌。
3.高压灭菌后,经自然冷却,待气压降至零时,将高压锅的锅盖打开点,当棉塞水分充分蒸发后取出,不用拆捆,直接摆成斜面。大量制斜面时,既快捷又很少占用空间,非常方便,还便于保温,减缓凝结速度,充分吸收游离水分。
4.如需将斜面培养基保存一段时间,可在灭菌前将聚丙烯塑料袋套在试管外并扎紧袋口,灭菌后取出,直接摆成斜面,可防止水分蒸发。
吉林省梨树市农村成人中专,黎九贤,郭焕富,于爱红
摘自于2003年第7期《农村实用科技》
  培养基的配置应该注意的几大步骤:
1、常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。
(1)平皿用纸或布包好,或装在金属日夏养花网盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。
(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。
(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。
2、培养基的制备及储存
(1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏。
(2)校正酸碱度(调节pH日夏养花网):培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证。测定时,一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤,使培养基澄清。( 更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中国标准物质 www.rmhot.com)
(3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。
平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。
斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。
高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min。含糖、血清、 鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温(25)后,都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定,浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的0.2的范围内,除非通过验证得到更宽的范围
  注意:按配方计算培养基中各种成分的用量→称量,(一般动作要迅速一些,因为其中可能有些成分容易吸潮)→溶化(将称好的各种成分溶解在水中,如果是固体培养基,需要使用凝固剂,如琼脂等,熔化时,注意搅拌,防止糊底)→调pH→灭菌(高压蒸汽灭菌)→倒平板
  1)确认培养基的成分,并精确称量;
2)加入各个成分的顺序;
3)准确调pH;
4) 适当的灭菌方法;
5)无菌条件下分装.

制备培养基中有哪些需要注意的点呢

关于培养基配制,当然是注意浓度配比不要搞错,很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生,有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀,
不要忘了调节pH值(一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定),加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质.

微生物培养基配置的基本步骤

什么培养基啊,
一般步骤是:1、计算
2、称量药品,如牛肉膏、蛋白胨;
3、溶化 按照顺利加入,防治沉淀产生;对于可溶性淀粉,先用少量冷水调成糊状,再放入沸水中。琼脂溶化温度96℃,凝固温度~40 ℃。
4、调pH值
5、分装
6、加塞;
7、包扎:注明培养基的名称、组别、配制日期;
8、灭菌 。0.1MPhttp://www.rixia.cca,121℃,灭菌20min即可。
9、搁置斜面:斜面长度不超过试管高度的1/2左右为宜;
10、无菌检查
望采纳。
1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量。
2,称量。
3,溶解。
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积。
5,分装。
6,消毒。
7,使用。
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别。

配制培养基有哪些步骤

培养基的配制步骤大方向一般有四步:

选择原料。培养基不同成分的选择,称量,处理(比如琼脂要剪碎,土豆要切块等)

处理原料。如果是固体培养基需要煮培养基,加入不同成分煮沸,分装试剂,液体培养基则溶解装入锥形瓶或者试管。

灭菌处理。一般是湿热灭菌,即在灭菌锅中处理。

倒平板。培养基稍微冷却后倒平板。

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