植物组织培养中用MS培养基，还有添加什么激素？

2021-10-02 18:18:34 分类：养花问答来源: 日夏养花网作者: 网络整理阅读：163

植物组培中MS培养基中都有哪些物质

MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg／L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl22H2O 8 800
MgSO47H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO44H2O 4 460
ZnSO47H2O 1 720
Na2MoO42H2O 50
CuSO45H2O 5
CoCl26H2O 5
铁盐(母液Ⅲ)
FeSO47H2O 5 560
Na2-EDTA2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
烟酸 100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸 400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后日夏养花网定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等植物生长调节物质，并且分别配成母液（0.1 mg/mL）。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量（1 mL）ldMIn无水乙醇预溶，将6BA用少量（1 mL）的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。
配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。
配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。
溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1 000 mL，搅拌均匀。
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸（5.4～7.0）测培养基的pH，一直到培养基的pH为5.8为止（培养基的pH必须严格控制在5.8）。
2 BA为细胞分裂素 NAA 是萘乙酸，为生长素的一种
3 适于百合根的激素暂时没找到
以下是叶片和胚的激素：对麝香百合 (LiliumlongiflorumThunb)叶片进行离体培养 ,可成功获得无菌苗。试验结果表明 :培养基MS +BA 0 1mg/L +NAA 1 0mg/L适于初代培养 ,有助于根和芽的分化 ;MS +BA 0 5mg/L +NAA1 5mg/L适于增殖培养 ,利于愈伤组织的产生 ,并促进芽的分化 ;生根培养基为 1/ 2MS +NAA 1 0mg/L +多效唑 10 0mg/L ;当试管苗根长 1cm时移栽易成活
在含有1 mg/ L IAA,1 m g/ L GA3,6 0 0 m g/ L CH的 MS培养基上培养 ,蔗糖含量为 6 %～ 8%时 ,百合幼胚胚性生长最好 ,培养 30 d后可以得到正常胚 .在含有 0 .1 m g/ L NAA,1 m g/ L BA的 MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织 ,将这些愈伤组织转移到 1 / 2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽 ,不定芽生根移栽后 ,其成活率可达90 %以上

植物组织培养加入的营养物质和激素分别有哪些？

营养物质主要有无机元素和有机物质两大类，无机元素依据含量多少大致分为大量元素和微量元素两大部分，其中大量元素有NH4NO3、KNO3、CaCl2.2H2O、CaCl2、MgSO4.7H2O、KH2PO4、(NH4)2SO4、Ca(NO3)2.4H2O、Na2SO4、NaH2PO4.2H2O、KCl，微量元素有KI、H3BO3、MnSO4.4H2O、MnSO4.H2O、ZnSO4.7H2O、Zn.Na2.EDTA、NaMoO4.2H2O、MoO3、CuSO4.5H2O、CoCl26H2O，铁盐（Fe2(SO4)3、FeSO4.7H2O、Na2.EDTA.2H2O、NaFe.EDTA）等，有机物质包括蔗糖、肌醇、烟酸、吡哆醇、硫胺素、甘氨酸、叶酸、生物素等。依据培养基种类的不同，成分组成和含量均有不同。
激素有生长素（2,4-D，IAA，NAA，IBA，NOA等）、细胞分裂素（BA、2ip、ZT、KT等），以及不常用的赤霉素、脱落酸和乙烯。

植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。植物组织培养需要加入蔗糖、大量元素、微量元素、植物生长激素等；动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。 ②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。 ③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH（36.50.5℃，7.2~7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。一般大肠杆菌都使用LB 培养基，
其成分如下：胰化蛋白胨、酵母提取物、 NaCl www.rixia.cc、如果是固体的培养基，就需要再加入琼脂粉

组织培养的基础培养基有MT、MS、SH、White等。基本培养基包括无机盐类的大量元素及微量元素和有机物质，碳源大多用蔗糖，有机养料包括水解酪蛋白、氨基酸、酵母提取液、椰乳等，维生素对生长也有促进作用。White培养基也经常用。Ms培养基是有较高的NO3一、K+和NH4+浓度，目前应用较广。

在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终可获得再生植株或次生物质。常用的激素类型有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类等。

一般认为，诱导愈伤组织的成败关键不在于植物材料的来源，而在于培养条件。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，而植物激素是愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素。诱导愈伤组织的生长素最常用的是IAA、NAA和2, 4-D，大多数材料选用2, 4-D，它对愈伤组织的诱导作用优于其它生长素，缺乏2, 4-D是导致直接出芽的原因。最常用的细胞分裂素是KT和6-BA。KT 的主要作用是促进细胞分裂，在分化培养基中，通常是添加KT、6-BA来促进愈伤组织分化。KT对愈伤组织诱导率不大，但在诱导培养基中添加KT 可以改善愈伤组织的质量，在一定程度上能延缓愈伤组织的衰老，延缓其器官分化能力的丧失，从而提高植株再生频率。