葡萄黄斑类病毒病的理化性质是什么?
葡萄扇叶病毒病的理化性质是什么?
病毒名称:葡萄扇叶病毒Grapevinefanleafvirus(GFLV)。
分类地位:线虫传多面体病毒属Nepovirus,豇豆花叶病毒科Comoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.018.0.03.016。
病毒异名:葡萄侵染性衰退、葡萄黄花叶、葡萄镶脉。
病毒的提纯:昆诺藜病叶加0.2mol/L磷酸缓冲液匀浆过滤。加氢仿、正丁醇澄清,5000r/min,离心20min,上清液加0.38%EDTA,3%NaCI搅至溶化,8000r/min,离心30min,沉淀悬浮于磷酸缓冲液,低速离心去渣,上清液于27000r/min,超速离心2h,沉淀再悬浮于磷酸缓冲液,低速离心,除去不溶物即为提纯制剂,呈典型核蛋白吸收曲线,A260/A280为0.55。
病毒理化特性:
①病毒粒子。病毒粒子为等轴球状,直径约30nm,为二分体基因组病毒。用蛋白酶处理可降低其侵染活性,而用苯酚或去污剂作去蛋白处理不影响侵染活性。提纯病毒含3种沉降组分,沉降系数分别为120S(B)、86S(M)和50S(T)。其A260/A280为1.67(B)、1.58(M)和0.73(T)。在氯化铯(CsCl)中的等密度点分别为1.49gcm-3(T)、1.41gcm-3(B)和1.31gcm-3(M)。
②核酸。基因组为线性单链RNA,全基因组大小为11.1kb,由两部分组成,大小分别为7.3kb和3.8kb。具有一种外壳蛋白,分子质量为2.4*106u和1.4*106u。
③蛋白。分子质量54000u,氨基酸残基461个。
电镜观察:该病毒为二分体基因组,在电子显微镜下观察,病毒粒子为等轴对称多面体,直径约30nm。病MMvJI毒粒子存在葡萄或草本寄主植物的根部、叶肉维管束薄壁组织。组织切片观察可见不同类型的内含体,为不定形,结晶状聚集在细胞质中或为管状,内含体中有病毒粒子。
病毒株系:根据在葡萄上的症状表现,GFLV可分为3个株系,即扇叶株系(fanleafstrain)(Hewitt,1950)、黄花叶株系(yellowmosaicstrain)(Hewitt,1950;Dias,1950)和镶脉株系(veinbandingstrain)(GoheenandHewwww.rixia.ccitt,1962;MartellirandHewitt,1963)。不同株系在血清学上密切相关,所有株系与南芥菜花叶病毒(ArMV)血清学远缘相关。
其他:发生在中欧(德国、法国)、巴尔干和北美(美国、加拿大)侵染葡萄的几种Nepoviruses属其他病毒,包括葡萄铬黄花叶、南芥菜花叶、番茄黑环和番茄环斑,他们在葡萄上的症状与GFLV相似,无法区分,在生态学和流行学方面也相似,只有在介体线虫(Xiphinema和Longidorus)的取食寄主方面有差别(Taylor&Brown,1997)。
保加利亚葡萄潜隐病毒病的理化性质是什么?
病毒名称:保加利亚葡萄潜隐病毒GrapevineBulgarianlatentvirus(GBLV)。
分类地位:线虫传多面体病毒属Nepovirus,豇豆花叶病毒科Comoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.018.0.03.014。
病毒提纯:保加利亚分离物用以下提纯步骤,较为满意:昆诺藜病汁,加7%镁活化皂土澄清,进行一遍差速离心和蔗糖密度梯度离心,平均产量为15~20A260units/100g病组织(Martellietal.,1977)。NY株系的病汁用冻融澄清,在硫酸铵液(200g/L)中透析,差速离心和蔗糖梯度(含0.1离子强度磷酸盐缓冲液,pH7.6),电泳(Uyemotoetal.,1977)提纯。
病毒理化特性:
①病毒粒子。球状病毒,直径30nm,沉降系数为52S(T)、120S(B1)、127S(B2),A260/A280=0.8(T)、1.7(B)。
②核酸。含量39%(B1)、42%(B2),单链RNA,分子质量2.2*106u(B1),2.1*106u(B2)。
③蛋白。单一组成,分子质量54ku。
葡萄栓皮病毒病的理化性质是什么?
病毒名称:可能为葡萄栓皮病毒Grapevinecorkybarkvirus(GCBaV)。
分类地位:可能为长线形病毒属Closterovirus。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.017.0.71.029。
病毒异名:葡萄粗皮病(Koughbark)。
病毒粒子:关于葡萄栓皮病的病原问题尚在研究之中。Corbett等(1985)在美国加州和南非,于感染栓皮病的葡萄上,发现两种线状病毒,粒子大小分别为8nm*1300nm和10nm*700nm,前者无一定螺旋结构,后者具螺旋结构。但在无病症和卷叶病、茎痘病植株中,也见到后一种粒子结构。故未肯定这些病毒就是栓皮病的病原。从症状学方面看,栓皮病可能是茎痘病与卷叶病复合侵染所引起的病害。而在MMvJI美国和墨西哥,根据栓皮病植株表现出茎痘病症状的株率在70%以上这一事实,则认为二者是同一病害(Teliz等,1982)。相反,在意大利和地中海的欧洲国家,这种情况却很少发生。因而栓皮病的病原尚有待于进一步研究明确。
葡萄卷叶病毒病的理化性质是什么?
病毒名称:葡萄卷叶伴随病毒Grapevineleafroll-associatedviruses(GLRaVs)。
分类地位:葡萄卷叶伴随病毒属Ampelovirus,长线形病毒科Closteroviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.017.0.03.003(GLRaV-3)。
葡萄卷叶伴随病毒的分类是通过血清学来确定的,目前已经有9种血清型互不相关的GLRaVs,它们均属于长线病毒科。随着分子生物学的发展和越来越多的GLRaVs的基因组序列被解读,2002年http://www.rixia.cc国际病毒分类委员会(ICTV)在长线病毒科中新增设了一个葡萄卷叶病毒属(Ampelovirus),并对GLRaVs进行了重新划分(表3-3-5)(Martellie日夏养花网tal.,2002)。目前9种GLRaVs中,已完成或大部分完成测序的有GLRaV-1(12.5kb/19kb)(Fazelietal.,2000)、GLRaV-2(15kb/15kb)和GLRaV-3(17.9kb/17.9kb),已完成GLRaV-4,5的HSP70基因的测序,还未见有关GLRaV-6,7,8,9序列的报道(Clandiaetal.,2000;Zhuetal.,1998;Lingetal.,1998;RouthandRowhani,1997)。
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