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组织培养的取材和配方有哪些?

2021-07-10 05:58:57 分类:养花问答 来源: 日夏养花网 作者: 网络整理 阅读:137

月季组织培养的配方是什么呀~~急求~

月季的哪部分做外植体?
月季的基因型?
想获得什么,愈伤组织还是芽?
先搞清楚这些才好选择激素,诱芽一般才采用细胞分裂素,愈伤组织多用2,4-4或NAA,根据不同的基因型可以调配激素的比例,可在知网中查找,相关文献很多!参考--愈伤组织:MS﹢6-BA5.0 mg/L﹢NAA1.0 mg/L,MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 1.0 mg/L 培养基配方为月季茎段诱导最佳培养基
花梗也就是花柄~就是支持花的那部分~结构和茎是一样的~
而茎是可以用来组织培养的~ 所以我觉得是可以的
诱导培养基:MA+BA0.5-1MG/ML+糖3%+琼脂0.4-0.5%
增值培养基:MS+BA1-2+NAA0.2(糖和琼脂同上)
生根:1/2MS+NAA0.1-0.2+IAA1.0(糖和琼脂同上)

桂花的组织培养的配方

桂花组织培养各阶段的培养基的配方,桂花的价值.
建议网友你上这个网站: http://www.cqvip.com/qk/98340X/200802/27822236.html 一、无菌培养物的建立 :建立无菌培养物的三项技术: (1)外植体的选择 (2)灭菌 (3)诱导培养对于易褐变的外植体还要有防止褐变的措施。1、 外植体的选择(1)遗传表型选择:(2)生理状态的选择:(3)取外植体的部位:(4)取外植体的季节和时间:(5)外植体大小与诱导成功率:2、外植体的灭菌消毒原则既要彻底消灭外植体表面的微生物,又要保持外植体正常活力。消毒剂良好的消毒作用,又要易被无菌水冲掉或自行分解掉。消毒程序消毒剂种类、浓度和消毒时间。 目前常用消毒方法:首先70~75%酒精,30秒,表面杀菌,后用其他消毒剂消毒;如: 0.1%升汞,5~10分钟 2~5%次氯酸钠,5~30分钟茎尖、茎段、叶片消毒程序:——70%乙醇30秒 —— 无菌水2~3次 —— 2~5%次氯酸钠10~15分 —— 无菌水3~5次种子的消毒程序:——10%次氯酸钠20~30分——无菌水3~5次根的消毒程序:——自来水冲洗——纯乙醇漂洗——0.1%升汞5~10分——无菌水3~5次3、诱导培养(1)外植体的切割:叶片0.5~0.8 cm2;茎段和顶芽以1cm长为宜。(2)接种:形态学下端插入培养基(如茎切段),叶平铺。不可将切块深埋于培养基中,以防无氧呼吸。(3)最佳培养基的筛选:主要因素: 基本培养基,植物生长物质的种类、浓度和配比。二、培养物的增殖(茎芽的增殖)是 离体繁殖 也称 微型繁殖 的关键步骤。1、通过愈伤组织诱导不定芽的形成不定芽(adventitious buds )是指从非正常(叶腋和茎尖)出芽的位置上诱导而形成的芽,如从根、叶和愈伤组织中诱导的芽 。优点:繁殖速度快。不足:遗传不稳定性;再生能力会下降。2、增强腋芽生枝能力含CTK、GA和生长素等的培养基,可增强枝条腋芽生枝能力。特点:此途径开始速度慢,但经一个时期后,枝条数目以对数增加;此途径为茎尖培养,所以不发生基因型的变化。注意:(1)繁殖代数不是越多越好;(2)每次继代培养,应求增殖系数最高,即产生数量最多的增殖体。三、根的诱导培养一般在增殖的芽长到1-2厘米时,即可转入生根培养基培养。生根培养基配方的筛选原则:发根快、多而粗壮,茎基部不形成愈伤组织。生根培养基应去除CTK,降低生长素浓度,甚至在无激素的培养基上进行发根。四、试管苗的移栽1、壮苗;2、炼苗; 3、移栽的适期:小苗刚发根或幼根小于1厘米时为移栽适期。

铁皮石斛组织培养的培养基成分有哪些?

铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基,也不只是这一种,其它的WV、winte等都可以用,但是一般多用MS培养基,也可以用1/2MS培养基,大量元素减半,其它元素不变。

除此之外,还有加一些生长素(如IAA、IBA、NAA等),细胞分裂素(如6-BA等)。但是不同的培养时期也不同的激素配合。如诱导愈伤组织时,要两种激素的配合。增殖传代时也要两种激素的配合,但生长素为主;分化时以分裂素为主,壮苗和生根以生长素不主。一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。

此外,还有的加了什么香蕉素,椰乳等。

动物细胞培养的取材要求

细胞培养--培养细胞的取材 人和动物体内绝大部分组织都可以在体外培养,但其难易程度与组织类型、分化程度、供体的年龄、原代培养方法等有直接关系,原代取材是进行组织培养的第一步。 取材的基本要求 (1)取材的日夏养花网组织最好尽快培养。因故不能即时培养,可将组织浸泡于培养液内,放置于冰浴或4度冰箱中。如果组织块很大,应先将其切成1cm3以下的小块再低温保存,但时间不能超过24h。 (2)取材时应严格无菌操作,用无菌包装的器皿或用事先消毒好的,带少许培养液的小瓶等便于携带的物品取材,取材过程中要尽量避免紫外线照射和接触化学试剂如碘、汞等。从消化道、周围有坏死组织等污染因素存在的区域取材时,为减少污染,可用含500~1000单位/ml的青链霉素液漂洗5~10min,或gDxHczbUGw用10%达克宁注射液冲洗浸泡10min再做培养. (3)取材和原代培养时,要用锋利的器械如刮脸刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤. (4)对于血液.脂肪.神经组织.结缔组织和 坏死组织,取材时要细心出去,修剪和切碎过程中,为避免组织干燥,可将其浸泡于少量培养液中. (5)原代培养,特别是正常细胞的培养,应采用营养丰富的培养液,最好添加胎牛血清,含量为10%~20%为宜. (6)一般来讲,胚胎组织较成熟个体的组织容易培养,分化底的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养.如无特殊要求,可采用易培养的组织进行培养,成功率较高. (7)为了便于以后鉴别原代组织的来源和观察细胞体外培养后与原组织的差异性,原代取材时要同时留好组织学标本和电镜标本.对组织的来源.部位.包括供体的一般情况要做详细的记录,以备以后查询. 取材的基本器材和用品 (1)眼科组织剪.弯镊.手术刀(用前消毒) (2)装有无血清培养基或Hank's液的小瓶 (3)小烧杯(10ml,50ml) (4)培养皿(特殊用途物品详见后面章节) 皮肤和粘膜的取材 皮肤和粘膜是上皮细胞培养的重要组织来源.一般皮肤黏膜主要取自手术过程中切除的部分组织,如特殊需要也可酌情单独取材.方法似外科取断层皮片手术的操作,但面积一般2~3mm2即可.这样局部不留疤痕.注意取材时不要用碘酒消毒. 皮肤黏膜培养多是以获取上皮细胞为目的,因而无论何种方法取材都不要切取太厚并要尽可能去除所携带的皮下或者黏膜下组织.如欲培养成纤维细胞则反之,皮肤.粘膜分布在机体外部或与外界相通的部位,故表面细菌.霉菌很多.取材时要严格消毒,必要时用较高浓度的 抗菌素溶液漂洗. 内脏和实体瘤的取材 人和动物体内所发生的肿瘤及各脏器是较常用的培养材料.内脏除消化道外基本是无菌的,但有些实体瘤有坏死并向外破溃者可能被细菌污染.内脏和实体瘤取材时,一定要明确和熟悉自己所需要组织的类型和部位,要去除不需要的部分如血管.神经和组织间的结缔组织,取肿瘤组织时要尽可能取肿瘤细胞分布较多的部分,避开坏死液化部分.但有些复发性.浸润性较强的肿瘤较难取到较为纯净的瘤体组织,其肿瘤组织与结缔组织混杂在一起,培养后会有很多纤维细胞生长,给以后的培养工作增加困难.对于一些特殊细胞培养的取材,详见以后的介绍。 血液中的白细胞是很常用的培养材料,常用于进行染色体分析.淋巴细胞体外激活进行免疫治疗等.一般多采用静脉取血,微量时也可以从指尖或耳垂取血.为防止凝血重用肝素抗凝剂,抗凝剂的量以产生抗凝效果的最小量为宜,量过大易导致溶血.肝素常用浓度为20U/ml,抽血前针管也要用浓度较高的肝素(500U/ml)湿润.抽血时要严格无菌. 骨髓.羊水.胸水.腹水内细胞的取材 要根据各种有关操作规程进行.详见以后的章节.这几种样品取材后一般不需要其它处理,离心后最好立即培养,不易低温保存. 鼠胚组织的取材 由于鼠胚组织取材方便,易于培养,同时与人类相近都是哺乳类动物,已成为较常用的培养材料.因为日夏养花网小鼠的毛中隐藏微生物较多,而且不易消毒.所以取材时更要注意无菌消毒,其无菌消毒一般采用以下方法进行:首先用引颈法杀死动物,然后将其整个浸入盛有75%酒精的烧杯中5min,注意时间不能太长以免酒精从口和其它孔道进入体内,影响组织活力.取出后放在消毒过的小木板上,用消毒过的图钉或大头钉将其固定.然后用眼科剪和止血钳剪开皮肤解剖取材.也可在酒精消毒后,在动物躯干中部环形剪开皮肤,用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾把动物反包,暴露躯干,然后在固定解剖 取材.区号的组织要放置在另一干净的平皿中或玻璃板上进行原代培养操作.动物消毒后的操作宜在超净台内或无菌环境中进行
幼嫩的动物组织,剪碎,胰蛋白酶处理时间适当,使组织分散成单细胞悬浮液。
用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织。
注意无菌。

组织培养各种培养基的配方?

希望是比较常用, 诱导愈伤组织的培养基 诱导发芽的培养基 诱导生根的培养基 希望高手能出来帮忙。。
我上学时用过的MS培养基:MS培养基
MS培养基配方 mg/L
大量元素:NH4NO3 1 650
KNO3 1 900
CaCl22H2O 440
MgSO47H2O 370
KH2PO4 700
微量元素:KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO44H2O 22.3
ZnSO47H2O 8.6
Na2MnO42H2O 0.25
CuSO45H2O 0.025
CgDxHczbUGwoCl26H2O 0.025
FeSO47H2O(27.8)+Na2-EDTA2H2O(37.3)
有机成分:肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇(维生素B6) 0.5
盐酸硫胺素(维生素B1) 0.5
甘氨酸 2
注意:肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液,因为它比较难溶,一般配成100倍,而除去肌醇后的有机,还是可以配成1000倍的。
注意事项:
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
2.母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
3.MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程日夏养花网需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。
在网上查,有的是,也可以到学术期刊网上查,但是也有故意造错的

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