银耳栽培的培养基配方有哪几种?如何选择?
一级种培养基配方有几种?如何制作?
银耳一级种培养基分为琼脂培养基和木屑培养基。木屑培养基配方和制作方法与原种、栽培种相同,下面介绍适于银耳一级种的10种琼脂培养基配方。
(1)PDA培养基
马铃薯250克,葡萄糖25克,硫酸镁0.5克,维生素B110毫克,琼脂20克,水1000毫EkruNwVBc升。
将马铃薯洗净去皮(已发芽的要挖掉芽眼),称取250克切成薄片,置于铝锅中加水煮沸30分钟,用4层纱布过滤取汁,用水补足1000毫升;再www.rixia.cc称取琼脂20克,用剪刀剪碎后加入马铃薯汁液内,继续加热,并搅拌,使琼脂全部溶化;加入葡萄糖,稍煮几分钟后,用2层纱布过滤,调节酸碱度为pH5.6;趁热分装入试管内,装量为试管长度的2/5,管口塞上棉塞,立放于试管笼上。分装时,应注意不要使培养基粘在试管口和管壁上,以免发生杂菌感染。
(2)PSA培养基
马铃薯200克,蔗糖20克,磷酸二氢钾3克,琼脂20克,水1000毫升。
制作方法与培养基配方之一相似,只是在加入葡萄糖更换为蔗糖,同时加入磷酸二氢钾,煮沸融化后过滤取汁,趁热装入试管中,塞好棉塞,直立放于试管笼上。
(3)CMA培养基
米粉60克,葡萄糖10克,琼脂20克,水1000毫升。
配制时先把玉米粉调成糊状,再加入1000毫升水,搅拌均匀后,文火煮沸20分钟,用纱布过滤取汁。再加入琼脂、葡萄糖等,全部溶化后,调节pH为5.6,然后分装入试管内,塞好棉塞。
上述3种培养基配方,适于培养银耳芽孢萌发,有利于与耳友菌丝混合发育生长。
(4)银耳木屑菌种2瓶(750毫升),过磷酸钙1克或磷酸二氢钾3克,琼脂25克,水1000毫升。
配制时将菌种瓶中的菌丝体挖出,置于1000毫升水锅中,烧开后再煮10~15分钟,过滤去渣取用滤汁,不足1000毫升的加水补足。再加入琼脂煮溶,放入过磷酸钙或磷酸二氢钾搅匀。最后分装入管,塞上棉EkruNwVBc塞,立放于试管笼中。
(5)银耳适生树的木屑50克,磷酸二氢钾3克,蔗糖30克,琼脂20克,水1000毫升。
配制时将木屑入锅加水煮30分钟,过滤取汁液,再补足水1000毫升,其他操作同上。
(4)、(5)两种培养基,适合银耳芽孢萌发菌丝。
c(6)马铃薯淀粉40克,葡萄糖10克,蛋白胨5克,氯化钠5克,磷酸二氢钾0.5克,琼脂22克,水1000毫升。
配制时,称取马铃日夏养花网薯淀粉,加入少量清水调成糊状,补足水至1000毫升;煮沸后再加入琼脂,用文火加热,并不断搅拌溶化,用多层纱布过滤,取其滤汁,其他操作同上。
(7)玉米粉50克,蛋白胨10克,琼脂20克,水1000毫升。
配制时,玉米粉加水250毫升煮沸20分钟,用6层纱布过滤去渣,取其滤汁;补足清水1000毫升,其他操作同上。
(6)、(7)两种培养基,适于银耳纯白菌丝培养。
(8)麦麸200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
配制时,先将麦麸放在铝锅中,加水1000毫升,用文火煮沸5分钟,用6层纱布过滤去渣,取用汁液。其他操作同上。
(9)黄豆粉40克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,琼脂20克,水1000毫升。
配制时,将黄豆粉调成糊状,再加入1000毫升水,搅至琼脂全部溶化;再加入葡萄糖和磷酸二氧钾,充分搅拌均匀;趁热分装于试管中,塞好棉塞,立放于试管笼中。
(8)、(9)两种配方适合培养羽毛状耳友菌丝生长发育。
(10)硫酸镁0.5克,磷酸二氢钾0.6克,磷酸氢二钾1克,蛋白胨2克,葡萄糖20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
配制时,将配方中化学药品置于烧杯中,用少量水溶化;量取1000毫升蒸馏水,将琼脂碎片煮溶;再将溶化的化学药品倒入琼脂液中搅匀;补足水至1000毫升,其他操作按常规。
本配方适于银耳芽孢与耳友菌丝交合。
二级种和三级种培养基如何制作?
银耳二级种和三级种是采用木屑固体培养基。为确保菌种生长发育良好,在培养基选料和配制上必须把握好以下5点:
(1)精选原料
选用适合银耳菌丝生长的树种。食用菌制种专业户实践表明,山乌桕、盐肤木、油桐、米槠、野漆、黄连木、杧果、栓皮栎、白蜡树等较为理想。加工成木屑不宜太粗,一般以麦麸、米糠状细度为好。此外甘蔗渣也可利用。
(2)合理配方
现有银耳原种和栽培种的培养基配方有以下3种:
配方之一:木屑67%,麦麸30%,蔗糖1.5%,石膏粉1.5%。
配方之二:木屑70%,麦麸25%,蔗糖3%,石膏粉1.5%,硫酸镁0.5%。
配方之三:甘蔗渣72%,米糠24%,黄豆粉3%,碳酸钙1%。
银耳菌种需要含氮量高的培养料,因此麦麸用量比其他菇类菌种多,但在气温高的季节配制时适当少些;蔗糖用量视木屑材质好坏及季节适当调节。
(3)拌料均匀
把晒干的适生树木屑,同麦麸或米糠、石膏粉先搅拌均匀;把蔗糖和硫酸镁置于水中溶化后,混合于料中,然后反复搅拌均匀,过筛,将结团打散。
(4)水分达标
每100千克干料加入清水130千克左右,含水量60%~63%。拌匀待水分渗透料心时进行检测,通常以手握紧培养料能成团不松散,指间有水溢出一滴,即为适合的含水量。如果有水珠成串下滴,为含水量过多;若无水痕渗出,则含水量不够。在气温高的季节里制种时,若有空调设备,培养基的含水量也应稍多一些,培养基的pH为5~6。
(5)装料适量
把http://www.rixia.cc调制好的培养料装入750克的玻璃菌种瓶中,压实,表面按平。银耳菌种装料量与众不同,二级种装料占2/3瓶量,三级种只装1/2瓶量。装料后将菌瓶内外壁和瓶口擦净,塞棉塞,及时灭菌。
(6)灭菌彻底
培养基常压灭菌灭菌仓升温到100℃,保持10~13小时,再利用灶内余火焖2小时。灭菌达标后,去盖让水蒸气散发,并利用锅内余温将瓶口棉塞烤干,冷却4~6小时。高压灭菌,0.152兆帕压力保持1.5~2小时。高压蒸汽灭菌的温度和蒸汽压力的关系见表6。
表6 蒸汽压力与温度的关系
黑木耳原种培养基怎么配制?
母种接种到原种培养基上,进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋装。
1.培养基配方-银耳菌种的制作
配方一 木屑麸皮培养基
阔树木78%、麸皮20%、糖1%、石膏粉1%、水65%、PH值自然
配方二 棉籽壳木屑混合培养基
棉籽壳90%、糖1%、麸皮5%、过磷酸钙3%、石膏粉1%、PH值自然
2.拌料与装袋
选用新鲜无霉变原料,根据生产所需的数量,计算配料总量,将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里,糖和过磷酸钙溶于水解后,按上述干料量加入水,比例为1:1、3拌匀,培养料含水量60%为宜,含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆闷30分钟后,装瓶(袋)。用机械或人工装袋稍加压实。塑料袋规格通常为袋宽9厘米,长21厘米,单层厚0.04厘米,在袋口外套入塑料环,形成象瓶子一样,然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。
原种灭菌方法有两种,高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌又称加压蒸气灭菌,灭菌原理:在高温(120℃)、高压(1公斤/厘米2)条件下灭菌2-3小时,将芽孢在内的微生物全部杀死。常压灭菌称流通蒸气灭菌,由于灭菌设备、条件和基本因素的不同,温度变动在90-103℃之间,其热力、穿透力不强,在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的,通常在100℃下维持8-10小时。
4.接种与培养
不论用接种箱或接种室接种,在接种前,需对接种箱或接种室用0.2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理,然后将灭菌过的料瓶(袋)放入接种箱内或接种室内,用紫外线灯照射30分钟后,在无菌条件下进行接种,或在接种前用烟雾剂密闭薰蒸消毒。即烟雾剂点燃消毒时应关闭门窗。接种室消毒,一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂;接种箱消毒每次仅用重量为40克,但又细分为20包的其中2包点燃即可(每包2克)。一般18180厘米,母种试管每支可接4—6瓶(袋)原种。将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养。以培养室温度22-26℃,相对湿度为80%以下,光线为弱散射光,发菌期间应保持良好的通风条件。原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天。
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