一、关于培养基配制
1、当然是注意浓度配比不要搞错
2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生
3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀
4、不要忘了调节pH值（一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定）
5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质
二、关于微量元素：要看是什么微量元素
1、如果是抗生素、维生素等不耐热物质,应该先过滤除菌,再加入灭好菌的培养基中.
2、如果是金属离子等耐热眼泪,可以配制成母液,配制培养基时加入适量即可同时灭菌.
三、关于浓度配比：既然需要配制培养基,就说明已经到了实验室阶段
1、为了可重复性.总不能今天是这样,明天又那样吧.
2、有适合不适合.
3、为了得到最好的培养效果.

1、选择适宜的营养物质
2、营养物质浓度及配比合适
3、控制pH条件
4、控制氧化还原电位(redox
potential)
5、原料来源的选择
6、灭菌处理

首先，在培养基的配制过程中，要看培养基成分，看是否有特殊物质的加入，以及成分之间是否有先后顺序，或者是一些抗生素的加入与否。
其次，培养基成分有相互作用的，要先配制母液，再分批加入。有抗生素的，要看抗生素类型，譬如氯霉素的加入，要事先灭菌好一次性过滤器。如果有放线菌酮类的加入，特别要做好个人防护，不可以用手直接接触。
再者，要看是否有蛋白胨类的物质加入，这些在煮培养基过程中，一定要不停的搅拌，要不然会突然暴沸，大量泡沫涌出白瓷钢。

楼主你好： 日夏养花网
培养基是微生物测定的基础，培养基的质量因而成了保证微生物实验成功的关键。培养基的制备、合理的贮存、培养基的质量检验，能确保提供持续高质量的培养基。在按照可接受的来源和标准中的配方制备培养基的过程中，重要的是选择正确的培养基和成分。与脱水和制备好的培养基一起的还常常伴有供应商的配方和说明。
微生物实验中培养基的配置应该注意的几大步骤：
1、常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。
（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。
（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。
（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。
2、培养基的制备及储存
（1）溶化：一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水，隔水加热以促其溶解，加热时应经常搅拌，防止焦结，待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时，先将蒸馏水按定量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10—15min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。
（2）校正酸碱度（调节pH）：培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一，测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低，一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右，灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定，并记下每次pH的测定结果，有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭mFDuaaD菌程序的耐受性，从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH，用时也必须再验证。测定时，一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化，或用pH计校正，如与所需pHwww.rixia.cc不符，可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤，使培养基澄清。( 更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中国标准物质 www.rmhot.com)
（3）培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。
平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。
斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。
高层斜面：制备高层斜面分装于试管，约占试管容积的1/3，灭菌后趁热放置成高层短斜面，待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天（2h内最佳）进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装，约装试管容积的1/3，在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基，灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。
培养基的灭菌：培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌，各种培养基的灭菌时间和压力，按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌15min，但容器和装量较大时，应延长至20min。含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min。含糖、血清、 鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，连续3d，间歇灭菌。血清或组织液，采用低热56—58水浴1h，连续5—6d灭菌，一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等，可用细菌过滤器，过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行，必须逐渐加热，彻底排除灭菌器内的空气，再逐渐升压保持预定的压力和时间，达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认，如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温（25）后，都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定，浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应日夏养花网该在规定的0.2的范围内，除非通过验证得到更宽的范围

基本原则：就是配制培养基的依据，比如讲我根据培养的细菌类别来确定培养基配方；根据配方来选择灭菌方法，一个例子就是糖最好不要高压灭菌，而采用过滤除菌。
步骤和注意事项：步骤就是配制培养基的程序，称量-溶解-分装-，等等吧；注意事项当然就是指在灭菌的过程中需要注意的问题，比如用水要用蒸馏水，不能用自来水，等等

按配方计算培养基中各种成分的用量→称量，（一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解在水中，如果是固体培养基，需要使用凝固剂，如琼脂等，熔化时，注意搅拌，防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板
1、培养基配方的选定
不用多说了吧，培养什么植物，用什么基础培养基，用什么激素，比例什么的
2、培养基的制备记录
实验记录...
3、培养基成分的称取
当然要乘凉准确了
4、培养基各成份的混合和溶化
各种成分之间，有可能会发生反应，一般是分开溶解的，如果是粗放型实
验，呵呵，另当别论了
5、培养基pH的初步调正
植物生长pH至关重要，一般是5.8～6，同时 pH值也关系着培养基的凝固程
度。
6、培养基的过滤澄清
7、培养基的分装、灭菌
这得根据你培养基的成分来定日夏养花网你的灭菌条件，比如容易碳化，你可以降低
温度，提高时间来达到相同的效果
8、培养基的保存
一般都要放在5-8℃冰箱中保存

1、培养基配方的选定
不用多说了吧，培养什么植物，用什么基础培养基，用什么激素，比例什么的
2、培养基的制备记录
实验记录...
3、培养基成分的称取
当然要乘凉准确了
4、培养基各成份的混合和溶化
各种成分之间，有可能会发生反应，一般是分开溶解的，如果是粗放型实
验，呵呵，另当别论了
5、培养基pH的初步调正
植物生长pH至关重要，一般是5.8～6，同时 pH值也关系着培养基的凝固程
度。
6、培养基的过滤澄清
7、培养基的分装、灭菌
这得根据你培养基的成分来定你的灭菌条件，比如容易碳化，你可以降低
温度，提高时间来达到相同的效果
8、培养基的保存
一般都要放在5-8℃冰箱中保存

固体、湿度、成分、对照组
液体、浓度、成分、对照组