使用加热灭菌法，在温度和压力等规定的灭菌条件下，要达到一定的加热时间，因灭菌物品的性质、灭菌容器的容积大小各异，所以，灭菌时间是从容器内全部达到规定的温度时开始计算。
1、火焰灭菌法，是利用火焰加热杀灭微生物的一种方法。
本办法以燃气为主，用于磁制与金属制口及在火焰中不会破损的物品。加热时间通常在喷灯或酒精的火焰中加热秒以上。
2、干热灭菌法，是利用干热空气加热杀灭微生物的一种方法。
本办法以燃气为主，用于磁制、金属制若干物品，纤维制物品，矿物油、脂肪、脂肪油、试验药物、固态的医药品等耐高温的物品；利用燃气和电能直接加热空气，将加热的空气进行循环，保持干燥与高温状态。通常，在以下几种条件下进行灭菌。
135℃～145℃ 3～5小时；160℃～170℃ 2～4小时；180℃～200℃ 0.5～1小时；200℃以上0.5小时以上。在密封容器中装入医药品、水溶液等，这些物品属耐高温的物品，可用134℃～138℃的热空气，加热3分钟以上进行灭菌。
3、高压蒸气灭菌法，是利用适当温度和压力的饱和水蒸气加热杀灭微生物的一种方法。本办法以燃气为热源，用于磁制、金属制、橡胶制、纸制、纤维制的物品、水、培养基、试验药品、试验液体和液态医药品等的灭菌，总之，用于耐高温高压水蒸气的物品。为确实达到灭菌，灭菌容器中的原有空气在操作中要从排气中排除，进行灭菌时，高压蒸气必须饱满。通常可在以下条件下进行灭菌。
115℃（0.7kg/cm²）30分钟；121℃（1.0kg/cm²）20分钟；126℃（1.4kg/cm²）15分钟。
4、流通蒸气灭菌法，利用直接加热的流通水蒸气杀灭微生物的方法。
本办法以燃气作为热源，对磁制、金属制、橡胶制、纤维制的物品、水、培养基、试验药品、试验液和液状的医药品等进行灭菌。用干热灭菌法或高压蒸气灭菌法，物品有变质的危险，所以在100℃流通水蒸气中灭菌需30～60分钟。
5、煮沸灭菌法，利用沉没在沸腾水中加热杀灭微生物的一种方法。
本办法以燃气为能源，对磁制、金属制、橡胶制、纤维制的物品、水、培养基、试验药品、试验液体、液状的医药品等进行灭菌，用干热灭菌法和高压蒸气灭菌法进行灭菌的物品有变质的危险。所以为增加杀菌效果，可以在沸腾水中加入1—2%的碳酸氢钠。将物品沉入沸腾水中进行灭菌时，煮沸时间应在15分钟以上。
6、间歇灭菌法，是利用80℃～100℃水或流通水蒸气，24小时为一周期，每隔30～60分钟反复加热3—5回；用来杀灭微生物的一种主法。用60℃～80www.rixia.cc℃的水反复加温也是一种间歇式低温灭菌方法。本办法主要用于以橡胶为主的制品，培养基、试验用药品、液体和液态状的医药等。 过滤灭菌法,即用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物,是一种常用的灭菌方法。对不耐热液体,过滤是唯一实用的灭菌方法. 滤器可分为深层型和过筛型两大类。深层滤器主要靠滤材的深度,通过机械性捕获或随机吸附进行过滤,多数滤材属此类型。过筛型滤器以物日夏养花网理过筛法将液体或气体中 。
有些需要灭菌的材料不能受热，例如许多维生素溶液。因此，许多液体可以用过滤法来灭菌。过滤法不是将微生物杀死，而是把它们排除出去。过滤除菌采用两类器具，一类叫深层滤器，例如用烧结玻璃、不上釉的陶瓷颗粒或石棉压成的滤板等：另一类是滤膜。深层滤器已经使用了100年以上，有逐渐被滤膜取代的趋势，但因为大量沉淀物容易堵塞滤膜，所以一般先用深层滤器除去大的颗粒。
滤膜一般由醋酸纤维素、硝酸纤维素、多聚碳酸酯、聚偏氟乙烯等合成纤维材料制成。滤膜的孔径一般为0.2微米，它可以滤除绝大多数微生物的营养细胞。过滤法的最大缺点是不能滤除病毒。
全办法主要用于气体、水、含有可溶性、不稳定物质的培养基、试验液体和液状医药品等。通常使用的过滤装置有膜过滤器，磁制过滤器、玻璃纤维过滤器等。 1、放射线灭菌法，包括放射性同位素在内的，利用从放射源产生射线进行照射，是杀灭微生物的一种方法。本办法，主要用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品与纤维制品等耐受放射线照射的物品。通常使用的放射源有60CO、137C5等，根据进行灭菌物品的材质、性状和污染状况等，对照射的总线量进行调节，以达到灭菌的目地。
2、紫外线灭菌法，是利用照射紫外线杀灭微生物的一种方法。本办法主要用于玻璃制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品和纤维制品等，还可用于设施、设备、水或医药品等，这些物品应对紫外线有良好的耐受性，通常，一般应用200—300nm的紫外线。
3、高频灭菌法，是直接用照射高频发热杀灭微生物的一种方法。本办法主要用于水、培养基、试验液体和液状的医药品等耐受高频照射的物品。通常采用915或2450兆周的频率。 1、气体灭菌法，利用环氧乙烷或甲醛性杀微生物的一种方法。本办法主要用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等，用于设施、设备或粉末状的医药品等，使用气体灭菌时，其被灭菌的物品以未变质为前提条件。
2、药液灭菌法，是用药液杀灭微生物的方法。本办法主要用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品、纤维制品等物品的灭菌，还可用于手指、无菌箱或无菌设备等的消毒，药液灭菌用于未变质的物品。通常使用的有乙醇（酒精）0.1—1w/v%盐化苯类溶液、甲酚、苯酚水或福尔马林水等。 将以上已经使用过的器具或材料在灭菌后，应在无菌箱或无菌设备内进行无菌操作。以上各种灭菌方法，主要用于医药品的调配、充填、密封等工艺性的操作，操作速度要快。
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高压蒸汽灭菌器使用方法如下：

一、消毒物品的初步处理。凡接触过病原微生物的医疗器械、被单、衣物等均应先用化学消毒剂进行消毒， 然后按照常规清洗。特别是传染病房用后的各类物品， 要严格把关， 先严密消毒后， 再清洗、消毒。常规清洗时，先用洗涤剂溶液浸泡擦洗，去除物品上的油污， 血垢等污物， 然后用流水冲净。有轴节、齿槽和缝隙等器械和其它物品，应尽可能张开或拆卸， 进行有效洗刷。洗涤后的物品应擦干，按各临床需要分类包装， 以免再污染。清除污染前、后物品的盛器和运送工具应严格区分，并有明显标志， 以防交叉感染。

二、消毒物品的包装和容器要合适。包装采用双层包布白色棉布，新包布应先洗涤去浆后再使用。物品包装用线绳捆扎， 以不松动散开为宜，不宜过紧。使用容器盛装时，选用既可阻挡外界微生物侵入， 又有较好的蒸汽穿透性。如特制的注射器灭菌盒、装敷料的贮槽等。民用铝盒因蒸汽难以进入， 而盒内的空气又不易排出，按常规灭菌常不能达到灭菌成效。试验对比表明它的污染率大大高于医用铝盒。所以不能使用民用铝盒装注射器或器械灭菌。

三、消毒物品装放应合理。消毒物品过多或放置不当都可影响灭菌成效。消毒锅内物品不能过挤，不超过锅内容量。尽量将同类物品装一锅内灭菌。若有不同类物品装放一起，应以量难达到灭菌物品所需的温度和时间为准。物品装放时，上下左右均应交叉错开，留出缝隙， 使蒸汽容易穿透。大消毒包应立着放上层, 小包放下层大搪瓷盒和贮槽也应立着放布类和金属类物品同时灭菌，应将金属类物品包放在下层，使两者受热基本一致，并防金属物品灭菌中产生的冷凝水弄湿包布。

四、排尽空气。使用高压蒸汽消毒锅时， 很关键的是将锅内空气排尽。如锅内有空气，则气压针所指的压强不是饱和蒸汽产生的压强。相同的压强， 混有空气的蒸汽其温度低于饱和蒸汽所产生的温度。

五、合理计算灭菌时间。灭菌时间包括：①穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始计算时间，到锅内较难达到的部位也达到此温度的时间；②维持时间，即杀灭微生物所需时间， 一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；③安全时间，为使灭菌得到确切确保所需增加的时间。一般为热死亡时间的一半， 其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。在灭菌时间内， 要注意压力表，及时间调节进气量，以保持在的压力， 维持到灭菌时间为止。在灭菌过程中， 如有压力、温度下降， 应重新升温升压，重新计时。

六、灭菌后。要求消毒物品干燥后，检查指示剂达到灭菌要求即可出锅。取无菌物品时， 要严格无菌操作，开盖物品先将盖盖好，贮槽关闭好通气孔。同时应分类放置， 顺序发放取用。超过有效期，炎热潮湿季节一般不超过七天。

七、防止超热蒸汽。超热蒸汽温度虽高，但象空气一样，遇到消毒物品时不能凝成水，不能释放潜热， 所以对灭菌不利。防止超热的办法是使用外源蒸汽灭器时，不要使夹层的温度高于消毒室的温度，两者应相近不要使压力过高的蒸汽进入消毒室内；灭菌时不要用压力高的蒸汽加热到要求温度，然后再降压力。

八、注意安全。每次灭菌前应检查灭菌器是否处于良好的工作状态，尤其是安全阀是否良好。消毒后减压不可过猛过快。应等压力表归回“0“位时，才可以打开锅门。如果消毒锅内是瓶装溶液，且突然开锅， 则玻璃骤然遇到冷空气易发生爆裂，必须注意如果突然把锅门开得太大，冷空气大量进入，易使包布周围蒸汽凝成水点而堵塞包布孔眼, 阻碍包布内蒸汽排出，而使物品潮湿。

九、不能使用高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致爆炸或腐蚀内胆和内部管道，以及破坏垫圈。危险物品清单：1.爆炸物质乙二醇二硝酸酯（硝化甘醇），硝酸甘油，硝化纤维素（硝化纤维素滤器）和所有含硝酸根的酯类。三硝基苯，黄色炸药，苦味酸和所有易燃易爆的硝基,过氧乙酸，甲烷基，乙基，甲醇，过氧化氢，过氧化物，苯甲酰，苯甲酰基及有机过氧日夏养花网化物。2.可燃性物质金属锂、钾、钠、黄磷、磷、硫化物、红磷。明胶、碳化钙（电石）、氧化钙（石灰），镁粉，连二亚硫酸钠（保险粉）。3.氧化剂氯化钾，氯化钠，氯化铵和其他氯化物。（粉剂）高氯酸钾，高氯酸钠，高氯酸铵和其他高氯化物。硝酸钾，硝酸钠，硝酸铵和其他硝酸物。过氧化钾，过氧化钠，过氧化钡和其他无机过氧化物。亚氯酸钠和其他亚氯化物，次氯酸钙和其他次氯酸物。4.易燃物质二，醚，汽油，乙醛（醋醛），氧化丙稀，环氧丙烷，二硫化碳和其他燃点在-30℃～0℃间的物质。甲醇，乙醇，二甲苯，苄基，乙酸苄酯，和其他燃点在0℃～30℃之间的物质（醇类）。灯油，火油，汽油，异戊醇，乙酸（醋酸），和其他燃点在30℃～65℃之间的类似物质。5.易燃的气体（氢气，乙炔，次乙基，甲烷）乙烷，丙烷，丁烷和其他在15℃及一个大气压下的气体。6．含有盐分的液体漏出或溢出时，一定要及时擦干净，沿着盖子的密封圈要有效擦干，否则会腐蚀容器和管道。7．在打开盖子前，确认压力已归于“0/npa”以下。8．不要在爆炸性气体附近使用仪器。高压蒸汽灭菌器的分类　　cdtouching /更新于 2012-06-12 点击量：245。

苏州海思源

全自动高压蒸汽灭菌器

高压蒸汽灭菌锅俗称灭菌锅，是对培养基（培养料）进行湿热灭菌的设备。制作母种宜用小型手提式灭菌锅或中型立式灭菌锅。制作原种、栽培种或代料熟料栽培时，可用大型卧式灭菌锅（灭菌柜）。正确使用灭菌锅，是安全生产的保障。

（1）灭菌锅加水

除部分灭菌锅配有专用供汽锅炉外，其他灭菌锅均需添加适量清水，再由水产生蒸汽。为此，加水必须注意两点：一是水质，二是水量。水质不仅要求清洁，而且最好用蒸馏水或去离子水，以免长期使用后产生水垢，影响设备正常使用。水量需按说明书要求加足，切忌过多或过少。

（2）灭菌锅装载量

为了便于蒸汽在灭菌锅内畅通循环，每次装载量要适当。一般提倡留下1/5～1/4的容积，既经济又有效。特别是袋装培养料，更要预留蒸汽通道，以免影响灭菌效果。

（3）排气升温

关闭灭菌锅门，开始加热升温。当锅内压力达到0.04兆帕时，需将锅内的冷空气排净，否则压力与温度不能同步上升，出现低温高压现象，影响灭菌效果（表5）。

表5灭菌锅内空气排除程度与温度的关系工作压力工作温度（℃）兆帕（千克力/厘米2）冷空气全排冷空气排2/3冷空气排1/2冷空气排1/3冷空气未排0.035（0.35）720.07（0.70）900.11（1.05）1000.14（1.41）1090.175（1.76）1150.21（2.00）121（4）灭菌条件

母种培养基的灭菌条件是：121℃，0.11兆帕，20～30分钟；原种、栽培种培养基的灭菌条件是：126℃，0.14兆帕，1.5～2小时。

操作步骤 

1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。 

2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。 

3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。 

4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟灭菌。 

5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。 

6．将取出的灭菌培养基放入 37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。

正确使用方法：

1、检查高压蒸汽灭菌锅里的水是否足够，关紧排水阀，将灭菌物品放进灭菌锅。

2、盖紧盖子打开电源，查看各指示灯是否正常，如果盖子没有盖紧，显示盖子的指示灯将会亮起，这时就需要重新盖盖子。

3、接下来就是调节灭菌温度和灭菌时间。

4、关闭排气阀，灭菌待灭菌时间一到，高压蒸汽灭菌锅将发出报警声，这时立刻关闭电源，待压力降低至零时，打开排气阀排气。（不能在压力很大是打开排气阀，以防危险发生）

5、待气排尽即可开盖，拿出灭菌物体。

扩展资料

注意事项

1、汽未放尽前，不得开启高压锅；

2、如果灭菌后的培养基在锅内不及时拿出，需在蒸汽放尽后将锅盖打开，切忌将培养基封闭在锅内过夜。

3、压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以防止压力急速下降，液体滚沸，从培养容器中溢出。

4、操作过程，请注意安全，小心烫伤。

在一个标准大气压下水的沸点是100摄氏度，压力越高,与之对应压力下的沸点越高，这里是高压蒸汽锅,说明压力肯定大于一个标准大气压(通常情况下的地表面的大气压强就认为是一个标准大气压)，也就是说高压蒸汽锅肯定要超过100摄氏度才能沸腾，才能产生蒸汽。

至少要等到水煮沸，排出一分钟左右的蒸汽后再把安全阀关闭，这样可以使高压蒸汽锅里的压力迅速上升，原来沸腾的水因为压力的快速上升而停止沸腾，压力大，沸点高，水蒸汽就变成液体水，而放出大量的汽化潜热，就是高温高压的目的，从而达到杀菌的目的。

在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，其原因有三：

一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低；

二是湿热的穿透力比干热大；

三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。

在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。

如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。要100度以上，也就是对应压力下的沸点后才能使水剧烈沸腾，将锅内空气更多的排除。