菌落总数大肠杆菌和致病菌的检测方法

2022-07-05 04:59:32 分类：养花问答来源: 日夏养花网作者: 网络整理阅读：124

抹布细菌（菌落总数、大肠杆菌）检测方法

一、大肠杆菌： 1）培养基准备（以3.5g乳糖胆盐发酵琼脂为例）双料试管配制 A、用量杯量取加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理方法详见注一）。 B、用0.1g称量天平秤取7g乳糖。 C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入三根装有小导管的试管中（此三根为双料试管，即双倍原料）。单料试管配制 A、用量杯量取日夏养花网加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理日夏养花网方法详见注一）。 B、用0.1g称量天平秤取3.5g乳糖。 C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入六根装有小导管的试管中（此六根为单料试管，即单倍原料）。 2）将配制好的试管放入灭菌锅进行115℃进行灭菌10min。 3）将灭菌过后的试管放置在无菌室，常温保存一周。 4）若要对生产的样品检测其大肠杆菌，其步骤如下： A、量取灭菌后的蒸馏水225ml加温后与25g样品混合均匀。（样品需要在无菌室中，有封盖的塑料杯中进行混合） B、取三个玻璃培养皿，分别标上-1、-2、-3标记。 C、取两根新试管取9ml蒸馏水分别标为a、b。 D、用吸管吸取1ml样品液体，注入-1培养皿中，并盖上盖子。 E、用吸管吸取1ml样品液体，注入a试管中，记为-2培养基液。 F、用吸管吸取1ml a试管中的液体，注入到b试管中，记为-3培养基液。 G、用1ml吸管取样品液体分别注入3根单料试管中，用10ml吸管取样品液体分别注入双料试管中 H、用1ml吸管取-2培养试管液体，分别注入到单料试管中。 I、装好液体的试管，用试管塞封好，放到36℃1℃的恒温培养箱中24小时培养。 J、 24小时培养后，取出并用肉眼观察试管的颜色及冒气泡情况，若有其中的任意状况，说明有大肠杆菌，需要通过美兰做进一步的检测

食品伙伴网可以查，就是餐厅、发廊的卫生检测法。

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菌落总数用平皿法，单位是个/ml(每毫升或毫克里面有多少的完整的菌落)方法是：在无菌操作的前提条件下，吸取1ml的原液加入到9cm的平皿里，在倒入3-5ml(37℃)的营养琼脂，在37℃的温箱里培养24小时，取出来计算它的菌落单位总数就行。

大肠杆菌用发酵法，单位是MPN/100ml(每100毫升或毫克的样品里面最大可能菌落形成单位)方法是15管法(适合食品)或9管法(适合非食品如游泳池水)用乳糖胆盐发酵管。

致病菌用培养法，只要符合相应的化学，生物试验就可以判断为某致病均阳性。

扩展资料：

大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是食品微生物检测中的常规项目，通常采用的传统方法需要大量的人力物力和较长的培养时间，而采用Petrifilm大肠菌群和大肠杆菌计数纸片（PEC）和Petrifilm金黄色葡萄球菌测试片（STX）只需24~48小时。

大肠菌群、大肠杆菌检测纸片含有改良的VRB（Violet Red Bile）培养基及葡萄糖普酸酶指示剂。绝大多数大肠杆菌能产生R一葡萄糖普酸酶，与培养基中的指示剂反应，产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌落周围，表面覆盖的胶膜，可留住发酵乳糖产生的气体，形成蓝色和深蓝色的菌落并有气泡相连。

参考资料来源：百度百科-快速测试片法

　　海鲜牡蛎属于食品，菌落总数和大肠菌群的检测方式可参考现行国标《GB 4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》和《GB 4789.3-2010 食品安全国家标准 www.rixia.cc食品微生物学检验大肠菌群计数》，其中有各种方法和检测流程的详细记述。