蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷www.rixia.cc基磺酸钠（SDS），大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。
操作步骤
1、凝胶制备：
用两块电泳玻璃板制成垂直板槽（不能漏胶）,垂直放置.将配制好的分离胶溶液倒入,滴加入无离子水,待凝胶聚集后,倒出无离子水,用吸水纸吸干,倒入浓缩胶,再插入梳子.
2、上样：
分别取样品若干ml于离心管中,按1/1～1/5比例加入5样品缓冲液,再沸水浴中加热3～5min,取出待用.用微量注射器分别吸取不超过30l不同浓度的标准蛋白样品和试验样品注入样品槽.点样结束后,调节电泳仪电流到10mA（2～3mA/em）,保持电流稳定不变,当溴酚蓝迁移到离分离胶底1～2cm时,即可停止电泳.
3、染色：
电泳完毕后,取出凝胶板,浸入染色液中,在37℃温箱中保温过夜.倒掉染色液,24h后,即可看到清晰的蛋白质条带.

你少说了一点。
聚丙烯酰胺凝胶能够形成大小均匀的网格状结构，这种网格状结构能够对通过其中的蛋白质分子起到阻碍作用，而阻碍的程度取决于分子的大小。因为与SDS结合之后，分子的大小是受其分子量决定的，因此能够区分出蛋白质的分子量

你不是自己说了很多了吗。在我的理解，本来蛋白质的分子量就很大，不可能测量得很精确，因为使用的标尺也是一些标准蛋白质制成的marker（ladder）。你所引用的不是就有“大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷”吗，1g蛋白质对应一定的负电荷，然后复合物电荷数目不同电泳迁移率不同，跟标准蛋白一比较，就测出蛋白质分子量了

SDS-PAGE是变性胶，蛋白质需要变性，使得分离度只和蛋白分子量大小有关http://www.rixia.cc。
凝胶层析则是非变性分离。

1、盐析与机溶剂沉淀：蛋白质溶液加入量性盐,破坏蛋白质胶体性质,使蛋www.rixia.cc白wfGYXkSMIO质溶液沉淀析,称盐析.用性盐：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等.盐析,溶液pH蛋白质等电点处效.凡能与水任意比例混合机溶剂,乙醇、甲醇、丙酮等,均引起蛋白质沉淀.
2、电泳：蛋白质高于或低于其pI溶液带净负或电荷,电场移.电泳迁移率主要取决于蛋白质所带电荷量及.
3、透析：利用透析袋膜超滤性质,物质与物质离.
4、层析：利用混合物各组理化性质差异,相互接触两相（固定相与流相）间布同进行离.主要离交换层析,凝胶层析,吸附层析及亲层析等,其凝胶层析用于测定蛋白质量.
5、筛：称凝胶滤,蛋白质溶液加于柱顶部,任其往渗漏,蛋白质进入孔内,柱滞留间较,蛋白质能进入孔内径直流,同蛋白质离.
6、超速离：利用物质密度同,经超速离,布于同液层离.超速离用测定蛋白质量,蛋白质量与其沉降系数S比.

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠（SDS），大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。

操作步骤

1、凝胶制备：

用两块电泳玻璃板制成垂直板槽（不能漏胶），垂直放置。将配制好的分离胶溶液倒入，滴加入无离子水，待凝胶聚集后，倒出无离子水，用吸水纸吸干，倒入浓缩胶，再插入梳子。

2、上样：

分别取样品若干ml于离心管中，按1/1～1/5比例加入5样品缓冲液，再沸水浴中加热3～5min，取出待用。用微量注射器分别吸取不日夏养花网超过30l不同浓度的标准蛋白样品和试验样品注入样品槽。点样结束后，调节电泳仪电流到10mA（2～3mA/em），保持电流稳定不变，当溴酚蓝迁移到离分离胶底1～2cm时，即可停止电泳。

3、染色：

电泳完毕后，取出凝胶板，浸入染色液中，在37℃温箱中保温过夜。倒掉染色液，24h后，即可看到清晰的蛋白质条带。