养花知识
花卉大全
花卉诊疗
多肉植物
养花攻略
养花问答
网站首页植物组织培养用什么培养基植物组织培养除了MS培养基
植物细胞培养和组织培养常用的四种基
在线等目前应用广泛的基础培养基有MS、B5、N6等
MS培养基：1962年穆拉辛格和斯库格为烟草细胞培养而设计，其中硝酸盐的浓度高，适合植物原生质体、细胞和组织培养。
B5培养基：1968年甘伯尔格为大豆细胞培养而设计，铵的浓度低。适合木本植物的组织和细胞培养。
富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一类，代表性的培养基有MS、LS 、BL 、BM 、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富，一般培养时无需再加入有机成分。
高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。
中盐培养基：代表性培养基有Nitsch、Miller、Blaydes、H。大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等。
低盐培养基：代表性培养基有White、WS、HE、HB。特点是：无机盐、有机成分含量浓度低，多用作生根培养的培养基。
组织培养基
1）类原球茎诱导愈伤组织培养基：B5+TDZ（噻苯隆）0-0.8mg/L+NAA（萘乙酸）0.20-0.80mg/L;噻苯隆（Thidiazuron）：一种植物生长调节剂，具有极强的细胞分裂活性。
NAA（萘乙酸）：生长素
2）继代增值培养基：B5+烯效唑0.50-1.50mg/L+NAA0.20-0.60mg/L+蔗糖2-5％；
烯效唑属三唑类化合物，具有强烈的生长调节功能。
3）分化培养基：B5+烯效唑0.75-1.25mg/L+6-BA（6-苄基腺嘌呤）0.5-1.5mg/L+NAA 0.20-0.60mg/L;
6-BA：细胞分裂素---类原球茎芽。
---当类原球茎上分化出的幼苗长到3-5cm时，切割下来，转到生根培养基中进行生根培养。
4）生根培养基：B5培养基，B5+AC（活性炭）0.05％，NAA0.20mg/L和琼脂粉0.68％。以上培养基的蔗糖浓度为3.5％。
MS培养基：1962年穆拉辛格和斯库格为烟草细胞培养而设计，其中硝酸盐的浓度高，适合植物原生质体、细胞和组织培养。
B5培养基：1968年甘伯尔格为大豆细胞培养而设计，铵的浓度低。适合木本植物的组织和细胞培养。
富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一类，代表性的培养基有MS、LS 、BL 、BM 、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富，一般培养时无需再加入有机成分。
高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。
中盐培养基：代表性培养基有Nitsch、Miller、Blaydes、H。大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等。
低盐培养基：代表性培养基有White、WS、HE、HB。特点是：无机盐、有机成分含量浓度低，多用作生根培养的培养基。
组织培养基
1）类原球茎诱导愈伤组织培养基：B5+TDZ（噻苯隆）0-0.8mg/L+NAA（萘乙酸）0.20-0.80mg/L;噻苯隆（Thidiazuron）：一种植物生长调节剂，具有极强的细胞分裂活性。
NAA（萘乙酸）：生长素
2）继代增值培养基：B5+烯效唑0.50-1.50mg/L+NAA0.20-0.60mg/L+蔗糖2-5％；
烯效唑属三唑类化合物，具有强烈的生长调节功能。
3）分化培养基：B5+烯效唑0.75-1.25mg/L+6-BA（6-苄基腺嘌呤）0.5-1.5mg/L+NAA 0.20-0.60mg/L;
6-BA：细胞分裂素---类原球茎芽。
---当类原球茎上分化出的幼苗长到3-5cm时，切割下来，转到生根培养基中进行生根培养。
4）生根培养基：B5培养基，B5+AC（活性炭）0.05％，NAA0.20mg/L和琼脂粉0.68％。以上培养基的蔗糖浓度为3.5％。
固体培养基 液体培养基 半固半液培养基 完全培养基
MS 最常见 B5 NLN 十字花科作物 N6禾本科常用
植物组织培养用什么培养基？
植物组织培养使用固体培养基。
固体培养基中所含成份：
1、无机营养元素包括N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl、I等。
2、有机营养物质包括糖类、氨基酸及其酰胺类，为植物提供碳、氢、氧、氮等。
3、生理活性物质包括维生素、尼克酸、肌醇、单核苷酸及其碱基。
原理：
固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分，只起固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件：不会被微生物分解利用；不会因高温灭菌而受到破坏；在微生物生长的温度范围内保持固体状态；对微生物及操作人员均无毒害作用；透明度好、凝固力强；价格低廉，配制方便。
常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖，绝大多数微生物都不能分解利用它。琼脂的熔点为96℃，凝固点为40℃，因此，在一般的培养条件下都呈固体状态，而且透明度强。正是这些优良特性，使琼脂取代了早期使用的明胶而成为常用的凝固剂。
植物组织培养用什么培养基植物组织培养除
植物组织培养的目的是完整植株,但因为是无土培养,所以要用固体培养基以起到固定植株的作用. 动物细胞培养的问题要先知道接触抑制这回事.接触抑制是指动物细胞在繁殖过程中如果相互接触便不会再往接触方向繁殖,举个例子,手上破个口子,在长的过程中只是保口子长好就行了,不会长出一大堆新肉来.用液体培养基也是一个道理,要让细胞充分铺平,不能长一点就不繁殖了. 我是学生物医学工成的,自认为很自信,但如有纰漏或错误还请见谅.
植物组织培养的培养基包括
培养基的配制 植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg／L
NH4NO3 33 000
KNO3FTZhJxcML 38 000
CaCl22H2O 8 800
MgSO47H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO44H2O 4 460
ZnSO47H2O 1 720
Na2MoO42H2O 50
CuSO45H2O 5
CoCl26H2O 5
铁盐(母液Ⅲ)
FeSO47H2O 5 560
Na2-EDTA2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
烟酸 100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸 FTZhJxcML 日夏养花网 400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（Nhttp://www.rixia.ccAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等植物生长调节物质，并且分别配成母液（0.1 mg/mL）。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量（1 mL）无水乙醇预溶，将6BA用少量（1 mL）的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。
配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。
溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加日夏养花网热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1 000 mL，搅拌均匀。
需要注意的是，在加热琼脂、制备培养基的过程中，操作者千万不能离开，否则沸腾的琼脂外溢，就需要重新称量、制备。此外，如果没有搪瓷量杯，可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸（5.4～7.0）测培养基的pH，一直到培养基的pH为5.8为止（培养基的pH必须严格控制在5.8）。
培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时，先将培养基倒入烧杯中，然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶（50 mL或100 mL）中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4。每1 000 mL培养基，可分装25～30瓶。
培养基分装完毕后，应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸（每块大小约为9 cm9 cm）中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口，并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg／L
NH4NO3 33 000
KNO3FTZhJxcML 38 000
CaCl22H2O 8 800
MgSO47H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO44H2O 4 460
ZnSO47H2O 1 720
Na2MoO42H2O 50
CuSO45H2O 5
CoCl26H2O 5
铁盐(母液Ⅲ)
FeSO47H2O 5 560
Na2-EDTA2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
烟酸 100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸 FTZhJxcML 日夏养花网 400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（Nhttp://www.rixia.ccAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等植物生长调节物质，并且分别配成母液（0.1 mg/mL）。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量（1 mL）无水乙醇预溶，将6BA用少量（1 mL）的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。
配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。
溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加日夏养花网热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1 000 mL，搅拌均匀。
需要注意的是，在加热琼脂、制备培养基的过程中，操作者千万不能离开，否则沸腾的琼脂外溢，就需要重新称量、制备。此外，如果没有搪瓷量杯，可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸（5.4～7.0）测培养基的pH，一直到培养基的pH为5.8为止（培养基的pH必须严格控制在5.8）。
培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时，先将培养基倒入烧杯中，然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶（50 mL或100 mL）中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4。每1 000 mL培养基，可分装25～30瓶。
培养基分装完毕后，应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸（每块大小约为9 cm9 cm）中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口，并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。
文章标签:
本文标题: 植物组织培养用什么培养基植物组织培养除了MS培养基
本文地址: http://www.rixia.cc/wenda/276701.html
上一篇：无籽葡萄和马奶葡萄有什么区别？
相关推荐