大肠杆菌的特点
大肠杆菌形态特征是什么
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大肠杆菌作为基因工程受体菌具有哪些特点
优点:
1、遗传背景清楚。目标基因表达水平高,表达系统成熟完善。
2、易于培养(培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强)、成本低,被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物。
缺点:
1、表达产物缺少饭以后的修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,而且大肠杆菌本身含有内毒素和有毒蛋白,可能混在产物里,应用受限。
2、真核生物的启动子不能被原核细胞(大肠杆菌)的RNA聚合酶识别。
3、真核生物的mRNA上没有SD序列,因此不能被原核细胞核糖体结合。
4、真核生物的基因含有内含子,原核细胞缺乏见他们的转录物进行拼接加工的机制。
5、真核细胞的基因产物,往往需要翻译后加工,真核细胞缺乏翻译后加工有关的酶。
6、真核生物基因表达的蛋白质易被原核细胞蛋白酶所降解。
扩展资料:
基因工程菌应具备以下条件:
1、发酵产品具有高浓度、高转化率和高产率;
2、菌株能利用常用的碳源,并可进行连续发酵;
3、菌株不是致病株,也不产内毒素;
4、代谢控制容易进行;
5、能进行适当http://www.rixia.cc的DNA重组,并且稳定。
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌
参考资料来源:百度百科-基因工程
参考资料来源:百度百科-基因工程菌
大肠杆菌作为基因工程受体菌的特点:
1、发酵产品具有高浓度、高转化率和高产率。
2、菌株能利用常用的碳源,并可进行连续发酵。
3、菌株不是致病株,也不产内毒素。
4、代谢控制容易进行。
5、能进行适当的DNA重组,并且稳定。
扩展资料:
检验方法:
1、发酵法:
这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。
然后对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法,还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。
主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。
2、滤膜法:
该方法主要过程:加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中,然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁,再进行过滤,将滤膜放在 M-FC 培养基中,两者之间不能够有气泡,然后进行密封。
存放温度为 44.5℃,存放时间约 24 h,直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。然后记录数据,估算每一单位的水溶液菌群数量,然后进行大肠杆菌量值的换算。
3、平板计数法:
用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,该样品与乳糖胆盐发酵类似,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的 CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合。
可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右,然后快速摇晃培养基,使其可以均匀覆盖平板表面,等其凝固以后,翻转培养基,在温度37℃中培养24 h左右,然后观察其形态,颜色等变化。
除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算。
4、免疫磁珠法:
该分离技术的主要原理是以磁珠为载体和抗体,进行抗体和磁珠的结合,然后通过磁力技术完成力学的移动,进而分离大肠杆菌。
与其他分离细菌的方式相比,这样的方式方法具有一定的优点,该技术可以提升样本中病原性弧菌的检测成功率,并且免疫磁珠技术可以于不同菌种中对不同的微生物进行处理,进而在很大程度上提高检测效率 。
5、自动化仪器检测法:
主要是运用免疫自动化分析仪,该技术产生并运用于1970年。
随着科技的发展和进步,自动化仪器检测技术应用非常广泛,并且操作起来非常方便,可以节约很多时间,其受干扰的程度较小,可以节省人力物力日夏养花网的投入,也可以提高检测的精确度。
在现阶段的发展过程中,自动酶的免疫检测体系的应用非常广泛。
6、ATP生物发光法:
在近些年的发展过程中,生物发光技术应用很广泛,是一种比较快速的检测微生物的技术。
在活性细胞中,ATP是其常见的能量代谢产,可以提供细胞生理活动过程中所需的能量。并且,该技术可以在生物体内可以在一定范围内保持一定的含量。
食品中的大肠杆菌检测技术可以采用荧光光度的方法,因为生物体发光的原因是有荧光素酶的作用,产生了发光的效果。
该物质来源于北美的萤火虫体内,可以催化荧光素的氧化作用,不过,该物质性质不稳定,可以对荧光进行快速分解。另外,该检测技术结果获得过程是非常快的,并且该设备携带方便,十分适用于现场检测。
参考资料来源:百度百科-基因工程菌
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌
遗传背景清楚 ;目标基因表达水平高;表达系统成熟完善;易于培养(培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强)、成本低;被美国FDA批准为安全的基因日夏养花网工程受体生物.
缺点:表达产物缺少饭以后的修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等);同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,而且大肠杆菌本身含有内毒素和有毒蛋白,可能混在产物里,应用受限.
真核基因在大肠杆菌中表达:
1,真核生物的启动子不能被原核细胞(大肠杆菌)的RNA聚合酶识别;
2,真核生物的mRNA上没有SD序列,因此不能www.rixia.cc被原核细胞核糖体结合;
3,真核生物的基因含有内含子,原核细胞缺乏见他们的转录物进行拼接加工的机制;
4,真核细胞的基因产物,往往需要翻译后加工,真核细胞缺乏翻译后加工有关的酶;
5,真核生物基因表达的蛋白质易被原核细胞蛋白酶所降解.
大肠杆菌的主要特点
大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌,周身鞭毛,能运动,无芽孢。主要生活在大肠内。
1、大肠杆菌是细菌,属于原核生物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含有核糖体简单的细胞器,没有细胞核有拟核;细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
2.大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。
3.人体与大肠杆菌的关系:在不致病的情况下(正常状况下),可认为是互利共生(一般高中阶段认为是这种关系);在致病的情况下,可认为是寄生。
4.在培养基培养时无需添加生长因子,向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌,菌落呈深紫色,并有金属光泽,可鉴别大肠杆菌是否存在。
5.大肠杆菌在生物技术中的应用:大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛,最成功的表达体系,常做高效表达的首选体系。
6.大肠杆菌在生态系统中的地位:假如它生活在大肠内,属于消费者,假如生活在体外则属于分解者。
7.它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子,同时可以有多个环状质粒DNA。
8.大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子,长度约为4 700 000个碱基对,在DNA分子上分布着大约4 400个基因,每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。
分析大肠杆菌的生长特点。
最适生长温度为37℃,在42-44℃条件下仍能生长,生长温度范围为15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态:
(1)光滑型: 菌落边缘整齐,表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色,在生理盐水中容易分散。
(2)粗糙型:菌落扁平、干涩、边缘不整齐,易在生理盐水中自凝。
(3)粘液型:常为含有荚膜的菌株。
此菌兼性厌氧,在有氧条件下生长良好,最适生长pH为6.8-8.0,所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。
代谢类型是异养兼性厌氧型
培养基中加入日夏养花网伊红美蓝遇大肠杆菌,菌落呈深紫色,可鉴别大肠杆菌是否存在
人体与大肠杆菌的关系:在不致病的情况下,可认为是互利共生;在致病的情况下,可认为是寄生。
代谢能力强,在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好;
最适生长温度为37℃,在42-44℃条件下仍能生长,生长温度范围为15-46℃。
什么是大肠杆菌,有哪些特点?
1886年Escherich从粪便中发现了大肠杆菌。在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,是人类和大多数温血动物肠道中的正常菌群。但也有某些血清型的大肠杆菌可引起不同症状的腹泻,根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类:致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。
大肠杆菌为革兰阴性短杆菌,大小0.5微米(1~3)微米。周身鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长,减少蛋白质分解产物对人体的危害,还能合成维生素B和维生素K,以及有杀菌作用的大肠杆菌素。正常栖居条件下不致病。但若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。在肠道中大量繁殖,几占粪便干重的1/3。兼性厌氧菌。在环境卫生不良的情况下,常随粪便散布在周围环境中。若在水和食品中检出此菌,可认为是被粪便污染的指标,从而可能有肠道病原菌的存在。因此,大肠菌群数(或大肠菌值)常作为饮水和食物(或药物)的卫生学标准。
大肠杆菌侵入人体一些部位时,可引起感染,如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。感染可能是致命性的,尤其是对孩子及老人。
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月,在温度较低的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感,但易耐药,是由带有R因子的质粒转移而获得的。
大肠杆菌O157∶H7是大肠杆菌的其中一个类型,即肠出血性大肠杆菌(EHEC),该种病菌常见于牛等温血动物的肠内。这一型的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,造成肠出血,约有10%可发展成肾出血。主要症状是突发性腹痛,并危及肝、肾。在小儿中常导致溶血性尿毒综合征,威胁生命。1996年在日本发生大规模EHEC流行,大肠杆菌O157∶H7食物中毒9451人,死亡12人,是由一所小学学生食用白萝卜芽引起的,以后通过粪便感染、交叉感染。此病迅速扩展至全日本,全世界都受到震惊。许多食物都可引起发此病,如生的或半生的肉、奶、汉堡包、果汁、发酵肠、酸奶、蔬菜等。
目前针对这种毒素尚无有效的治理方法,主要预防措施是不吃生食,若食物的所有部分均加热至75℃,便可消灭大肠杆菌O157∶H7;因此,碎牛肉及汉堡等应彻底煮至75℃达2~3分钟,直至煮熟的肉完全转为褐色,而肉汁亦变得清澈再食用。如有需要保留吃剩的熟食,应该加以冷藏,并尽快食用,而变质的食物应该弃掉。
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