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如何配置生根培养基?

2021-11-29 13:20:40 分类:养花问答 来源: 日夏养花网 作者: 网络整理 阅读:112

此培养基如何配置?

MS+5.0 mg/L IBA
以配制一升培养基为例: 应该在950 ml去离子水中加入: 胰蛋白胨10g 酵母提取物5g nacl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/lnaoh调日夏养花网ph至7.0,用去离子水定容至1l。在15psi高压下蒸汽灭菌21min。 扩展资料: 配置原则: 1、选择适宜的营养物质 日夏养花网就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。 在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏i号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。 2、营养物质浓度及配比合适 培养基中营www.rixia.cc养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。 另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(c/n)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。 3、控制ph条件 培养基的ph必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适ph条件各不相同,一般来www.rixia.cc讲,细菌与放线菌适于在ph7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在ph4.5-6范围内生长。 值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基ph发生变化,若不对培养基ph条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。 4、控制氧化还原电位(redox potential) 不同类型微生物生长对氧化还原电位(f)的要求不一样,一般好氧性微生物在f值为+0.1v以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4v为宜,厌氧性微生物只能在f值低于+0.1v条件下生长,兼性厌氧微生物在f值为+0.1v以上时进行好氧呼吸,在+0.1v以下时进行发酵。 5、原料来源的选择 在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。 6、灭菌处理 要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。 在配制培养基过程中,泡沫的存在对灭菌处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。

如何配制组织培养用的培养基

(1)MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的.特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液.其养分的数量和比例较合适,可满足植物的营养和生理需要.它的硝酸盐含量较其他培养基为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好.有些培养基是由它演变而来的.(2)B5培养基 是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的.其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用.从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜,如双子叶植物特别是木本植物.(3)White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的.1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度和增加了鹏素.其特点是无机盐数量较低,适于生日夏养花网根培养.(4)N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的.其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高.在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养.(5)KM-80培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的.其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合的培养.以上是常见的植物培养基,也是利用率最广的.

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培养基要怎样配制?

配制培养基前,要洗净备齐以下器具,主要包括不同型号的烧杯、容量瓶、移液管、滴管、玻棒、三角瓶以及培养基分装器等。

用于配制培养基的水最好是蒸馏水或无离子水,精细的试验须用重蒸馏水。化学药品应采用分析纯AR(二级)或化学纯CP(三级),以免杂质对培养物造成不利影响。药品的称量及定容要准确,不同化学药品的称量需使用不同的药匙,避免药品的交叉污染与混杂。

培养基怎么配置

(1)配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中可使用半年到1年,这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m配制母液要用重蒸馏水药物要使用分析纯或等级较高的化学纯药物的称量和药液的定容都要准确。

母液①:硫酸镁18.5克.硝酸铵82.5克.硝酸钾95.0克;加水定容到1000毫升,浓度为培养基的50倍,配1升培养基时量取20毫升母液

母液②:氯化钙22.0克加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液

母液③:磷酸二氢钾8.5克加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液④;乙二胺四乙酸二钠3.73克硫酸亚铁2.78克,加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液

母液⑤:硼酸620毫克,硫酸锰2230毫克,硫酸锌860毫克,硫酸铜2.5毫克,碘化钾83毫克,钼酸钠25毫克,氯化钴2.5毫克,加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100信,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液⑥:肌醇5克,甘氨酸100毫克,烟酸25毫克,盐酸吡哆醇25毫克,盐酸硫胺素5毫克,加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液

(2)配制培养基。配制每1000毫升培养基.称取6~10克琼:脂作凝固剂,具体按配方要求称量,放在水浴锅上慢慢溶解,先在量筒内放入一定量的水,按照母液顺序和规定量,量取母液,当母液加完后,根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等,细胞分裂素类0.04~10毫克,细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤,加完后倒入已熔化的琼脂中,每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定,定容到所需的体积,继续加温,直到琼脂完全熔解,用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节,多数培养基的pH在5.4~6.0,MS培养基的pH为5.7。

将配好的培养基趁热倒入培养容器中,培养基占容器体积的1/4~1/3不要将培养基沾到容器壁上,否则容易被杂菌感染,然后及时加盖,进行高压灭菌,灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用.在121℃、压力111千帕下维持15~20分钟,温度和时间都要严格控制,到时间后立即切断电源,当高压锅内压力降到常压后,开启放气阀,打开锅盖,取出灭菌好的培养基,放在接种室中培养3天,没被感染后才能用来组织培养

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